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生物医学研究中实验动物的选择原则和方法

 

  无胸腺裸体鼠、其胸腺先天性缺陷,T淋巴细胞缺损,缺乏免疫应答性,因此,可不发生免疫排斥反应,适于免疫生物学、免疫病理学、移植免疫、肿瘤免疫、病毒和细菌免疫等实验研究,它又是研究胸腺功能最适宜的天然动物模型。它作为一种新的动物模型活跃于上述各领域的研究中,在短短的几年内便开展了一系列富有成效的研究,推动了各方面的工作,为实验免疫学和实验肿瘤学提供了新的有效工具。如近年来已能将许多不同组织类型人肿瘤组织在裸鼠身上移植成功,在裸鼠身上移植砂鼠皮肤也能存活,移植鸡皮亦可见皮肤上长出鸡毛。裸鼠能感染、繁殖麻疯杆菌,而以往麻疯杆菌只有背上长够九条纹、难于寻找和饲养的犰狳(Armadillo)身上才能生长,这就为研究和制造麻疯菌提供了十分有利的条件。实践证明,裸鼠也是病毒、细菌和寄生虫感染机制研究、肿瘤免疫研究和疫苗、菌苗安全性和免疫原生物制品鉴定的最好实验材料和动物模型。

  无菌动物是在无菌屏障系统中,剖腹取出胎儿,饲养繁殖在无菌隔离器中,饲料、饮水经过消毒,定期检验,证明动物体内外均无一切微生物和寄生虫(包括绝大部分病毒)。选用这类动物作实验,可以排除普通动物带有各种微生物和寄生虫影响实验结果的干扰,使实验结果正确可靠。

  悉生动物体内所带的微生物是完全明确的。一般是将1~2种以上的已知微生物,人工接种于无菌动物内定居,即明确带有单菌、双菌、三菌、或多菌的动物。此种动物和无菌动物一样是放在隔离器内饲养的,因此选用此种动物作实验,正确性也很高,常用于研究微生物和宿主动物之间的关系,并可按研究目的来选择某种微生物。

  无特定病原体动物体内应无特定的微生物和寄生虫,但其他微生物和寄生虫允许存在,是无传染病的健康动物。一般是将无菌动物或悉生动物移到有封闭系统的设施中进行饲养繁殖而成的。SPF动物虽不是完全无菌,但仍保留有无菌动物的基本特点,不携带有影响实验效果的病原微生物和寄生虫,所以选用这类动物作实验正确性高、重复性好。选用时必须注意不同试验有不同要求,只有在了解某项试验中涉及到那些病菌,选用才有意义。

  目前无菌动物、悉生动物和无特定病原体动物展开广泛应用于医学科学研究的各个领域。

  三、选用解剖、生理特点符合实验目的的要求的动物

  选用解剖生理特点符合实验目的要求的实验动物做实验,是保证实验成功的关键问题。很多实验动物具有某些解剖生理特点,为实验所要观察的器官或组织等提供了很多便利条件,如能适当使用,将减少实验准备方面的麻烦,降低操作的难度,使实验容易成功。

  家犬的甲状旁腺位于甲状腺的表面,位置比较固定,大多数在两个甲状腺相对应的两端下。家兔的甲状旁腺分布得比较散,位置不固定,除甲状腺周围外,有的甚至分布到主动脉弓附近,因此作甲状旁腺摘除实验,应选用家犬而不能选用兔,但作甲状腺摘除实验,为使摘除甲腺之后,还保留甲状腺的功能,则应选用兔而不能选用家犬。

  小鼠、大鼠及豚鼠的气管和支气管腺不发达,只在喉部有气管腺,支气管以下无气管腺,选用这些动物作慢性支气管炎的模型或去痰平喘药的疗效实验就不合适。猴等动物则不然,气管腺的数量较多,直至三级支气管中部仍有腺体存在,选用这种动物就很适宜。

  家兔颈部的交感神经、迷走神经和主动脉减压神经是分别存在,独立行走的,而以马、牛、猪、狗、猫、蛙等其他动物的减压神经并不单独行走,而是行走于迷走、交感干或迷走神经中,因此,如要观察减压神经对心脏等作用时,就必须选用家兔。

  地鼠口腔内两侧的颊囊是缺少组织相溶性抗原的免疫学特殊区,是进行组织培养,人类肿瘤移植和观察微循环改变的良好区域,适于作免疫学、组织培养、肿瘤学和微循环功能等的实验研究。

  乌贼有一条巨大的神经纤维,能允许微电极插入其纤维内,尚保留接近正常的活动机能,常选用它来作神经纤维的膜电位和动作电位的实验。

  家兔的胸腔结构与其它动物不同,胸腺中央有一层很薄的纵膈膜将胸腔分为左右两部,互不相通,两肺被肋胸膜隔开,心脏又有心包胸膜隔开,当开胸和打开心包胸膜,暴露心脏作实验操作时,只要不弄破纵膈膜,动物不需要人工呼吸,给实验操作带来很多方便,很适合于作开胸和心脏实验。

  家犬的红绿色盲,不能以红绿作为条件刺激物来进行条件反射实验。家犬的汗腺不发达,不宜选作发汗实验,胰腺小,适宜作胰腺摘除手。家犬胃小,相当胃长径的一半,容易作胃导管,便于进行胃肠道生理的研究,家犬的嗅觉特别灵敏,喜近人,易于驯养,经短期训练能很好地配合实验。家犬分成四种神经类型,即强、均衡的灵活性;强、均衡的迟纯型;强、不均衡型和弱型,这对一些慢性实验,特别是高级神经活动实验的动物选择很重要。一般均选用前二种神经类型的家犬作实验。国外常选用一种小猎兔家犬(Beagle)作研究,此种动物由于具有毛短、体形小、性温驯、易于抓捕、毛色为黄、黑、白三色,最适用于毒物学、药物学和生理学研究用,特别适用于长期慢性实验。

  猴、家犬、猪、羊、豚鼠、大鼠和小鼠等实验动物按一定性周期进行排卵的,不交配也可正常排卵,而兔和猫属典型的刺激性排卵动物,只有经过交配的刺激,才能进行排卵。如家兔的卵巢几乎连续不断地产生卵子,但成熟的卵泡只有经过雄兔交配后才能排卵,因此可选用成年雌兔来诱发排卵,是观察药物对排卵的影响,进行避孕药研究的常用动物。青紫兰种家兔后肢腘窝部有一个粗大的淋巴结,在体外极易触摸和固定,适于向淋巴结内注射药物或通电,进行免疫功能研究。家兔有食粪癖,晚上吃自己白天的粪便,特别喜欢刚拉下来的软便,因家兔小肠下段肠管能吸收这些粪便中的粗蛋白和水溶性的B族维生素,如选用家兔进行营养实验时,应注意控制其食粪习性,否则会影响实验结果。

  一般实验动物均有胆囊,大鼠无胆囊,就不能用它来作胆囊功能的研究,而适合作胆管插管收集胆汁,进行消化功能的研究。豚鼠、家犬、猫、猴等较大的实验动物,正常心电图均有明确的S-T段,但大鼠和小鼠等较小鼠类没有S-T段,甚至有的导联见不到T波,如有T波也是与S波紧挨着,或在R波降支上即开始,经我们实验证明这与大鼠心率快慢无关,可能与啮齿类哺乳小动物心肌复极化过程很缓慢,电动力相互抵消有关。此点在选择动物品种时应注意。

  小鼠6-7周龄时性已成熟,性周期短,孕期20天左右,特别有产后发情便于繁殖的特点,它的子宫生长极快,适于作雌激素和避孕药的研究。成年小鼠和大鼠在动情周期不同阶段,阴道粘膜可发生典型的变化,根据阴道涂片的细胞学改变,可进行卵巢功能的测定实验。

  雄鸡头上长有很大的红鸡冠,这是雄鸡的重要性特征,适于作雄性激素的研究。

  人和实验动物在解剖、生理及代谢方面的比较可参考表8-3。

表8-3 人和实验动物在解剖生理及代谢方面的比较

动 物

相 似 点

相 异 点

小 鼠 老龄肝变化 肝脏、脾脏
大 鼠 脾脏,老龄胰变化,老龄脾变化 网膜循环,心脏循环,无胆囊,肝脏,汗腺
脾脏血管,脾脏,免疫,神经分布,鼓膜张肌 肝脏,汗腺,呼吸细支气管,肺
豚 鼠 脾脏、免疫 汗腺
脾脏血管,蝶骨窦,表皮,锁骨,硬膜外,脂肪分布,鼓膜张肌 脾脏,对异种蛋白的反应,汗腺,喉部中隔,性索的发育,睡眠,热调节
垂体血管,肾动脉,脾脏,脾脏血管,蝶骨窦,肾表血管,肝脏,表皮核酸代谢,肾上腺神经分布,精神变化 心丛,肠道循环,网膜循环,肾动脉,胰管,热调节,汗腺,膈,喉神经,睡眠,淋巴细胞显性
心血管分支,红细胞成熟,视网膜血管,胃肠道,肝脏,牙齿,肾上腺,皮肤,雄性尿道 淋巴细胞显性,脾脏,肝脏,汗腺,丙种球蛋白(新生)
绵 羊 脾脏血管,汗腺 动静脉吻合,消化,胃,呕吐,热调节,睡眠
山 羊 静脉管 淋巴细胞显性,消化,胃,呕吐,热调节,汗腺,睡眠
灵长类 脑血管,肠循环(猩猩),胎盘循环,胰管,牙齿,肾上腺,神经分布,核酸代谢,坐骨区(新世界猴),脑(大猩猩),生殖行为,胎盘,精子 止血,腹股沟,坐骨区(旧世界猴)
升结肠 淋巴细胞显性,消化,胃,呕吐,丙种蛋白(新生),乳腺,热调节,
肺血管,胰管,肝脏  

 

 

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