1.5 电导，射频法
与早期的三分类血液分析仪利用库尔特原理不同的是，它在内外电极上加了一个RF射频发生器。RF是射频电流的简称.它是一种高频交流变化电磁波。按照工作频率的不同，RF可以分为低频(LF)、高频(HF)、超高频(UHF)和微波等不同种类.不同频段的RF工作原理不同， 和HF频段一般采用电磁耦合原理，而UHF及微波频段的RF一般采用电磁反射原理。在血液分析仪中多采用高频电磁波，其原理是交变电流通过导体时，会在导体周围形成交变电磁场，形成电磁波。因导体的密度及导电性质等差异，其周围所形成的电磁场也不相同。因此当射频电流穿透细胞膜透入胞内时，由于核的大小、化学组分、颗粒多少以及浆核比例的不同，使RF信号发生不同的变化。借此可以将体积大小相同但内部结构不同的细胞区分开来，如淋巴细胞与嗜碱性细胞。
1.6 荧光法
利用不同细胞的细胞膜、胞内因子以及胞内DNA、RNA、胞内离子钙等不同染色特性，选用具有特异性抗原或抗体的荧光染料载体，使待分离的细胞分别标记相应的荧光物质，经过特定波长的激光照射激发出不同波长的荧光，利用各种PMT管检测荧光信号的个数，可以完成待检细胞的计数 如进一步分析计数淋巴细胞或网织红细胞等
2 血细胞五分类技术的应用及展望
2.1 五分类血液分析仪的现状
全自动五分类血细胞分析仪是多学科相互交叉、渗透、综合的产物，涉及技术领域包括电子技术、计算机技术、传感器技术、信号处理技术、生物化学、临床医学、精密机械、光学、自动控制、流体力学等领域。绝大多数“五分类”分析仪采用了流式细胞分析方法，而联合检测法则代表了五分类血细胞分析仪的最新发展趋势。
BECKMAN COULTRER GENS全自动五分类血球分析仪采用其独特的VCS技术，其中V(体积法)用于分析细胞体积；C(电导法)用于分析细胞核型；S(散射法)则用于分析细胞的颗粒特性。测试时。患者标本经过分血片等样本分配系统进入搅拌杯中，再加入溶血剂搅拌.溶血.完全破坏红细胞，剩下的白细胞在样本压力作用下进入流式通道。运用VCS联合检测方法，在流式通道的某一位点。对通过的单列白细胞，进行逐个的、同时的、三重的检测以及三维分析，以确定其亚群性质。
雅培公司新推出的CELL-DYN Ruby全自动血液分析仪运用合并流式细胞术及多角度偏振散射分离技术检测白细胞。其采用多角度偏振散射技术对白细胞进行区分和按序分离，通过四个角度的光学检测进行白细胞分析。其中，0度用于区分细胞体积大小；10度用于区分细胞的复杂性；90度用于区分细胞核的分叶性；90度D用于区分细胞的颗粒性。通过90度偏振和90度去偏振区分嗜酸性粒细胞和嗜中性粒细胞， 同时通过多个散点图分析来鉴别和分类未成熟细胞和干扰物质。
拜尔公司的ADV IA120利用化学特性中过氧化物酶活性与激光散射技术结合原理进行白细胞五分类测定。该仪器有4个测量通道：血红蛋白测量通道、红细胞／血小板测量通道、嗜碱性粒细胞测量通道、过氧化物酶测量(白细胞分类)通道。其利用五种白细胞过氧化物酶活性的差异对白细胞进行染色.测定其酶反应强度，对自细胞进行分析。在测试过程中.每个细胞产生2个信号：组化染色结果与光散射结果。www.med126.com以X轴代表吸光率(组化染色酶反应强度)，Y 轴代表光散射(细胞大小)，一起定位于细胞图上(cytogram)。计算机系统对存储资料进行分析处理，并结合嗜碱性或分叶细胞通道结果计算出白细胞总数及分类。值得一提的是，该设备对RBC及PLT的测定也摒弃了传统的阻抗法，而是采用激光法对其进行测定的。
希森美康(SYSMEX)公司五分类血液分析仪的检测原理按生产时间的先后可分为三大类：多通道阻抗与射频联合检测技术.代表机型有SE一9000；激光流式细胞检测结合细胞组化染色技术，代表机型有SF一3000；激光流式细胞检测结合核酸荧光染色技术，代表机型有SF一2l00。
