研发手记
血清胱抑素C是肾小球滤过率优良的内源性标志物，能够准确地反映肾损害程度，逐渐受到临床专家的重视，临床急需该项目的检测方法和检测试剂。因胱抑素C血清浓度较低，测定方法需较高的分析灵敏度及特异性，各种检测的方法也在不断发展。早期有单向免疫扩散法及酶免疫测定法，这两种测定方法操作复杂、耗时长且灵敏度低。随后相继出现较简单灵敏的放射、荧光及各种酶免疫测定方法，在一定程度上改善和提高了测定的简便性和可靠性。上世纪90年代出现了一种夹心酶免疫测定方法，检测灵敏度高，但测定时间长。这些测定方法都属非均相测定方法，操作烦琐，部分方法存在污染，未能在临床上得到广泛应用。为满足临床检验的需要，中生北控生物科技股份有限公司在2007年初立项自主研制血清胱抑素C测定试剂盒。
2007年4月，此项目正式进入研发阶段。根据文献调研，确定试剂盒的反应原理及剂型。试剂盒利用抗原抗体结合产生凝聚的原理，根据该项目检测灵敏度的要求，采用颗粒增强免疫比浊法液体双试剂剂型。研发人员分别对反应体系中的缓冲系统、抗体原料进行了筛选，确定原料种类、来源及缓冲系统。对标记抗体的制备和反应体系进行优化，最终确定了试剂盒配方。该试剂盒的R2选择纳米级胶体金作为胱抑素C抗体的标记物，在反应过程中标记胱抑素C抗体和血清中的抗原结合而发生凝聚，反应液在特定波长下吸光度发生改变以达到检测目的。经过标记的抗体提高了试剂检测灵敏度，最低检测限达到毫克级，完全满足了临床检测灵敏度的要求。经过全面的性能测试，试剂具有检测范围宽，重复性好，抗干扰性强的特点。试剂应用多点定标和非线性校准，可在全自动生化分析仪上自动完成，检测时间缩短至10分钟以内，极大地方便了临床检测应用。
2008年12月至2009年5月，该试剂盒在卫生部北京医院和中国医学科学院阜外心血管病医院完成临床试验，经过严格规范的实验，分别对试剂盒的最低检测限、精密度、测定范围、抗干扰性、相关性等指标进行了临床测试，结果与进口试剂相关性良好。在2009年11月，经过严格的现场考核，研发程序和试剂现场抽样程序，试剂盒顺利通过质量体系考核，为试剂盒完成注册打下良好基础。（作者系中生北控“CysC测定试剂盒”项目负责人)
