14、单糖发酵管培养基(半固体)
成份: PH7.6-7.8蛋白胨水 1000毫升(0.3克/100毫升)
1.2%酚红液 0.4毫升
琼脂 0.4 - 0.5克
10%糖或醇 10毫升
制备:把蛋白胨水,琼脂加热溶解,然后加1.2%酚红液0.4毫升,10%糖10毫升,混匀,分装试管,每管约2-3毫升,经115℃高压灭菌20分钟后,分置于试管架上,贴上各类糖或醇类标签备用。
质控标准:细菌发酵糖类或醇而产生酸,能使培养基PH改变,指示剂由红变黄色,如因发酵产生气体则半固体内产生气泡,如有动力则半固体由清亮变混浊。
15、明胶培养基
成份:肉浸液 1000毫升(牛肉浸膏5克)
明胶 12克
制法:
100毫升肉浸液中,加入明胶12克,隔水加热煮化,校正PH7.2,分装小号试管,用阿诺氏间歇灭菌80℃30分钟,连续3日,或者108℃高压20分钟,冷却,贮存备用。
15-1、碱性蛋白胨水
成份:
蛋白胨 20克 氯化钠 5克
硝酸钾 0.1克 结晶碳酸钠(NaclCO3.12H2O) 0.2克
水 1000毫升
制法:将蛋白胨,Nacl,硝酸钾,结晶碳酸钠称好,溶于1000DW中,校正PH8.4分装试管,121℃高压灭菌15分钟后备用 。
用途:用于霍乱弧菌培养。
16、葡萄糖蛋白胨水(M。V用)
成份:蛋白胨 5克 葡萄糖 5克
K2HPO4 5克 水 1000毫升
制法:将上述称好溶解分装试管,调PH7.4高压灭菌115℃ 灭菌20分钟 ,或者葡萄糖加热煮沸后再倒试管
标准:灭菌试验合格。接种大肠杆菌VP阴性,M阳性;接种产气杆菌VP阳性,M阴性。
用途:作鉴别肠道杆菌用。
17、枸椽酸盐培养基
成份:磷酸二氢铵 0.1克 硫酸镁 0.02克
磷酸氢二钾 0.1克 枸椽酸钠 0.23--0.5克(0.36)
氯化钠 0.5克 琼脂 1.5克
0.5%溴麝香草酚兰2毫升 (调PH6.8再加)
制法:将上述称好,放入水中煮沸溶解,调PH6.8,然后分装中号试管,高压灭菌,趁热倒呈斜面,凝固
后备用。
标准:1、灭菌试验合格,培养基呈果绿色适宜。
2、接种大肠杆菌,培养基上不生长,也不变色。
3、接种产气杆菌,培养基呈深兰色。
用途:作鉴别大肠杆菌用。
18、双糖铁培养基
成份:
下层:蛋白胨 1克 氯化钠 0.5克
葡萄糖 0.2克 琼脂 0.3-0.5克
水 100毫升
将上述物质混匀调PH7.6后加1.2%酚红0.4毫升
上层:蛋白胨 1克 氯化钠 0.5克
乳糖 1克 硫代硫酸钠 0.03克
硫酸亚铁 0.02克 琼脂 1克
水 100毫升
制法: 1将下层配好,分装中号试管(1毫升),塞好包扎,15磅高压灭菌半小时,使凝固后备用。
2制上层时,先将蛋白胨水制好,加入硫酸亚铁,硫代硫酸钠,加热溶解PH8.1,再加入酚红分瓶,(每瓶300毫升,称取琼脂包扎灭菌,趁热加入乳糖隔水煮沸30分钟或112℃消毒15分钟)。
3取已制的下层管,每管用无菌法倒入上层液约1。5毫升,边斜放置使成斜面,凝固后备用。
标准:无菌试验合格,接种大肠杆菌下层产酸产气,上层产酸。
19、尿素培养基
成份:蛋白胨 0.1克 氯化钠 0.5克
磷酸二氢钾 0.2克 尿素 0.2克(或10%2毫升)
葡萄糖 0.01克(或10%葡萄糖0.1毫升)
H2O 100毫升 酚红(0.2%) 0.4毫升
制法:1除葡萄糖,尿素外把其它药品称好放入水中煮沸,使溶解,调PH7.2过滤,15磅高压灭菌15分钟.
2配制尿素(灭菌)液:每100毫升基液内加2毫升.
3配制10%葡萄糖(灭菌)每100毫升加0.1毫升.
4分装小试管待用.
标准:
1灭菌试验合格.
2接种变形杆菌24小时呈红色.
用途:鉴定变形杆菌用.
20、胆盐中性红琼脂
成份:蛋白胨琼脂PH7.2-7.4 5000毫升
胆 盐 2.5克
乳糖 5.0克
对氨基苯甲酸 25毫克
1%中性红溶液 25毫升
制法:
将胆盐,对氨基苯甲酸,乳糖趁热加入已灭菌之蛋白胨琼脂中,待冷至50-60℃时,加入1%中性红液2.5毫升,混合后即倾注平皿,凝固待用.
*:1%中性红:1克中性红加酒精60毫升,加水40毫升
21、丙二酸盐培养基(缩苹果酸钠)
成份:丙二酸钠 0.3克 酵母浸膏 0.1克
Nacl 0.2克 硫酸铵 0.2克
K2HPO4 0.06克 KH2PO4 0.04克
水 100毫升
PH6.8,高压灭菌备用.
0.2%溴麝香酚兰乙醇 1.25毫升
制法:与枸椽酸盐利用试验相类似,是测定细菌能否利用丙二酸盐与碳源.无机铵盐为氨源而生长,生长者使培养基变成碱呈兰色.
鉴定: 克氏杆菌 (+) 赫夫尼亚 (+)
沙门氏菌 (—) 痢疾杆菌 (—)