串联亲和纯化技术(tandem afinity purification，TAP)是近年来发展的一种能够快速研究生理条件下蛋白质相互作用、揭示蛋白质复合体相互作用网络的新技术，如今已经成为研究蛋白质组学的一个被广泛采纳的工具。此技术使用特别设计的纯化标签在非常接近于生理条件的情况下，能捕捉出特定的蛋白质及其作用伙伴，借助于质谱分析技术，研究人员即可鉴别出这种蛋白质相互作用组。标签共分3部分：蛋白A、钙调素结合多肽(calmodulin binding peptide。CBP)和中间连接的烟草病毒(TEV)蛋白酶识别的酶切位点。带有TAP标签的融合蛋白在细胞中表达，且与医学全.在线内源相互作用蛋白形成复合物，细胞裂解后经IsG偶联的层析柱纯化，蛋白A与IgG特异结合，从而使含有标签的复合物得到第一次纯化。为除去与柱填料非特异结合的蛋白，用TEv酶切割分离蛋白A标签，使含有靶蛋白的复合物与层析柱分离，并经过钙调素偶联的亲和层析柱进行第二次纯化，靶蛋白上的CBP标签可与钙调素结合；在加入过量螯合剂后CBP与亲和层析柱分离使含有靶蛋白的复合体得到分离纯化，经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS．PAGE)，复合物中的各个蛋白被分开，切胶、胰酶消化后，即可通过质谱鉴定复合物中各个蛋白的氨基酸序列。该方法的优点：(1)不需要过多的背景知识就可以得到大量含靶蛋白的复合体。(2)蛋白表达及与复合物的结合都接近生理水平。是一种检测体内蛋白相互作用的方法。(3)TAP采用两步亲和纯化，提高了纯化产物的特异性。
