随着电子技术、流式细胞技术、激光技术、电子计算机技术和新荧光化学物质等多种高科技术在临床检验工作的应用,血细胞分析仪在自动化程度、先进功能和完美设计方面已经提高到一个新的阶段。BC-5500型五分类血液细胞分析仪是深圳迈端生物医疗电子股份有限公司近年来推出的较新产品,并在临床检验市场中得到了较好的推广使用。本文以血细胞分析流程为线索对其工作原理展开论述,为广大临床工程师及血细胞分析检验人员提高设备使用效率和保养质量,有效延长设备使用寿命提供理论上的参考。
1、吸取样本根据配置的不同,本分析仪提供三种进样方式。分别为:开放进样方式、封闭进样方式、自动进样方式。其中。开放进样方式支持全血和预稀释模式,封闭进样和自动进样方式支持全血模式。在自动或封闭进样方式下,分析仪将吸取180μl的全血样本。在开放进样的全血工作模式下,分析仪将吸取120μl的全血样本。在开放进样的预稀释工作模式下,操作者应先将40μl的末梢血样本和120μl的稀释液在机外混合,形成稀释比为1:4的稀释样本,然后再将此稀释样本送至分析仪进行采样,分析仪将吸入120μl的稀释样本。
2、稀释样本待测样本采集到分血阀后,根据检测的需要快速准确地被分为四份。然后,在并行的四个稀释流程中经过不同的试剂作用,分别形成用于红细胞/血小板测量、血红蛋白测量、白细胞分类测量和白细胞计数测量的检测样本。
2.1 全血模式的样本稀释流程
2.1.1 红细胞/血小板稀释
全血样本8.3μl-→加稀释液2.992ml变成1:361的样本-→取60μl再加稀释液2.94ml得稀释比为1::18050的待检测样本。
2.1.2 血红蛋白稀释
全血样本6μl-→加入稀释液1.994ml和M-50LH溶血剂1.0ml变成1:500检测样本。
2.1.3 白细胞分类稀释
全血样本20μl-→加M-50LEO(Ⅰ)溶血剂1.02ml再加M-50LEO(Ⅱ)溶血剂0.32ml以稀释成1:68的白细胞检测样本。
2.1.4 白细胞计数稀释
全血样本20μl-→加M-50LBA溶血剂1.02ml稀释为1:52的白细胞检测样本。
2.2 预稀释模式下的样本稀释流程
2.2.1 红细胞/血小板稀释
40μl末梢血样本-→加稀释液120μl变成1:4的样本-→取其8.3μl加 2.992ml稀释液为1:1444的样本-→取此样本60μl加2.94ml的稀释液得1:72200的待测样本。
2.2.2 血细蛋白稀释
40μl末梢血样本-→加稀释液120μl变成1:4的样本-→取6μl先加稀释液1.994ml,再加M-50LH溶血剂约1.0ml得到1:2000的待测样本。
2.2.3 白细胞分类稀释
40μl末梢血样本-→加稀释液120μl变成1:4的样本-→取其20μl加M-50LEO(Ⅰ)溶血剂1.02ml,再加M-50LEO(Ⅱ)溶血剂得到1:272的待测样本。
2.2.4 白细胞计数稀释
40μl末梢血样本-→加稀释液120μl变成1:4的样本-→取其20μl加M-50LBA溶血剂1.02ml,得到1:208的待测样本。
3、白细胞测量本机采用激光流式细胞技术进行参数取样,得到血细胞大小及细胞内部信息的二维分布图(即散点图),进而经过满足特定运算关系的逻辑电路处理,在电脑显示终端输出WBC、Bas#、Bas%、Lym%、Neu%、Mon%、Eos%、Lyn#、Mon#、Eos#、Neu#等测量结果。
4、血红蛋白浓度测量待测样本进入比色池中,在比色池的一端让LED光管发出波长为525nm的单色光照射血红蛋白复合物溶液。在另一端通过光电管接收透射光,转换为电压信号,并与医.学全在线www.lindalemus.com比色池中加入样本之前的相应信号比较,经过满足
HGB(单位为g/L)=常数×Ln( )特定运算关系的DSP逻辑电路处理后将分析结果显示在“计数”界面。
5、红细胞/血小板测量
本分析仪利用电阻抗法对红细胞/血小板进行计数。(如下图所示),小孔两侧有一对正负电极,连接电流为Ⅰ的恒流电源。由于细胞具有不良导体的特性,其穿过小孔瞬间使两电极间电阻r(t)立即增大,电极间电压u(t)随之增大。
u(t)=Ir(t)
u(t)函数脉冲及其脉冲幅度就能再现出穿过小孔细胞的数量和体积,u(t)信息经相应逻辑运算处理的DSP电路即可得出在设备终端显示的RBC、MCV、HCT、MCH、MCHC、RDW-CV、RDW-SD、PLT、MPV、PDW、PCT等技术参数。
6、小结BC-5500五分类血液细胞分析仪采用电阻抗法检测红细胞和血小板的数目以及体积分布,采用比色法测量血红蛋白浓度,采用半导体激光流式细胞技术获得白细胞总数和五类白细胞的分类统计计数。经过吸取样本-→稀释样本-→测量样本-→结果显示-→液路冲洗的工作流程提供23项血液参数以及4项研究参数的血量分析结果,并提供2个直方图和2个散点图。