1．试述瑞氏染色中pH对细胞染色的影响及实际工作中应注意的问题。
【答案】细胞的各种成分均由蛋白质构成，由于蛋白质是两性电解质，所带正负电荷的数量随溶液pH值而定。对某一蛋白质而言，如环境pH<pI(蛋白质的等电点)，则该蛋白质在酸性环境中正电荷增多，易与医学全.在线www.lindalemus.com伊红结合，染色偏红；相反，当环境的pH>pI即在碱性环境中负电荷增多，易与亚甲蓝结合，染色偏蓝。临床上常用缓冲液(pH 6.4～6.8)来调节染色时的pH值，同时还应注意使用清洁、中性的玻片，优质的甲醇配制染液以期达到满意的染色效果。
2．简述氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定的原理及注意事项。
【答案】原理：红细胞在Hb转化液中溶血后，除SHb，外各种Hb均可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白(Hi)，Hi再与试剂中CN-结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白(HiCN)。HiCN的最大吸收波峰为540nm，根据测得的吸光度值，即可计算出Hb浓度。注意事项：①试剂中的氰化钾有剧毒，处理不当可造成严重公害；②HiCN转化液不能储存在塑料瓶中，否则会使CN-丢失，结果偏低；③此法不能测定SHb，对HbCO的转化较慢，遇高球蛋白或高白细胞血症时溶液易混浊。
3．试述标本溶血的主要原因及溶血后产生的主要影响。
【答案】引起标本溶血的原因主要有：注射器和容器不干燥、不清洁，压脉带捆扎太紧、时间太长，穿刺不顺利产生的损伤，抽血速度太快，未取下针头直接将血液注入容器、抗凝混匀用力振荡等。标本溶血产生的影响主要有：红细胞总数、血细胞比容降低，红细胞内成分外溢，影响钾、镁、氨基转移酶、胆红素等多项指标的准确性。
4．简述血红蛋白测定的方法学评价。
【答案】 (1)HiCN法：①此法是ICSH和WHO推荐的参考方法，具有操作简便、结果稳定可靠、除SHb外其他Hb衍生物均可检测、读取吸光度后可直接定值等优点；②该法致命弱点是试剂中含剧毒药氰化钾，使用处理不当可造成严重公害。废液须经过处理方可排放；③此法也不能测定SHb，对HbCO转化较慢，遇高球蛋白或高白细胞血症时溶液易混浊。 (2)SLS法：①此法突出优点是试剂无毒性；②操作简单，呈色稳定，准确性和精确性符合要求，被推荐为次选方法；③但SLS本身质量差异较大，且SIS会破坏WBC，不适于同时进行白细胞计数和Hb测定。(3)碱羟血红蛋白(AHD575)测定法：准确度、精密度均较高，可用氯化血红素作标准品。但该法反应产物的吸收峰位于575nm处，溶液中碱性较高，目前血细胞分析仪均未采用。 (4)叠氮高铁血红蛋白(HiN3)测定法：与HiCN相似，准确度、精密度较高，试剂毒性比HiCN低，但仍存在公害问题。 (5)溴代十六烷基三甲胺(CTAB)血红蛋白测定法：该法试剂溶血性强又不破坏WBC，可同时进行白细胞计数，可用于血细胞分析仪自动检测Hb和WBC。缺点是对Hb测定结果的准确度和精密度略低于以上各法。
5．简述十二烷基月桂酰硫酸钠(SLS)血红蛋白测定的原理。
【答案】原理：除SHb外，各种Hb均可与低浓度十二烷基月桂酰硫酸钠作用，生成SLS-Hb棕红色化合物。SLS-Hb最大吸收波峰538nm，波谷500nm。，肩峰560nm。由于摩尔消光系数尚未最后确认，因此不能用吸光度“A”值直接计算出浓度。只有借助于经HiCN法定值的抗凝血或溶血液，制备标准工作曲线，间接得到Hb浓度。
6．简述网织红细胞计数的临床意义。
【答案】(1)判断骨髓的造血功能：①网织红细胞增多：表示骨髓造血功能旺盛。急性溶血性贫血、急性失血性贫血时网织红细胞可明显增高；缺铁性贫血和巨幼细胞性贫血时，网织红细胞正常或轻度增高；②网织红细胞减少：表示骨髓造血功能低下，多见于再生障碍性贫血。(2)作为贫血治疗的疗效观察指标：缺铁性贫血和巨幼细胞性贫血的患者治疗后，网织红细胞升高说明治疗有效，贫血愈严重，网织红细胞升得越高，而且其升高在红细胞和出升高之前；反之，如果网织红细胞不见增高，说明治疗无效或骨髓造血功能有障碍。
(3)骨髓移植后监测骨髓造血恢复情况。
