生化检验常用的标本(specimen) 有血液、尿液、脑脊液和腹水等,其中以血液标本最为常用。
一、检验申请单
申请单是实验检查的第一步。一份完整的申请单应包含以下内容: 条码号, 门诊号,住院号;病人的姓名,性别,出生日期;病房,床位号;临床诊断,问题或特殊检验注意事项;申请检查项目;标本类型;采样时间, 标本接收时间(年、月、日、时、分);有关治疗情况(如用药情况);医生姓名等。其中有关的临床和治疗信息,特别是用药信息是检验师评价结果的必要条件。药物可能在体外影响分析方法或在体内引起病理变化,因而,要特别注意在申请单上提供此类信息。
二、血液标本的采集
生化检验用的血液标本可来自于静脉、动脉或毛细血管。静脉血是最常用的标本,静脉穿刺是最常用的采血方法。毛细血管采血主要用于儿童,血气分析多使用动脉血。
(一) 静脉采血法
1.采血步骤
采血前核对病人姓名、性别、年龄、编号及检验项目等,按试验项目要求,准备好相应的容器,如空白试管、抗凝管或促凝管等。病人应取坐位或卧位,采血部位通常是前臂肘窝的正中静脉。若用普通采血法,采血后应取下针头,将血液沿管壁缓慢注入试管内。
2.注意事项
(1) 防止溶血:造成溶血的因素有注射器和容器不干燥、不清洁;淤血时间过长;穿刺不顺利,组织损伤过多;抽血速度太快;血液注入容器时未取下针头或注入速度过快产生大量泡沫;震荡过于剧烈等。若用普通注射器采血后,未取针头直接将血注入真空管内,也易造成溶血。体内溶血属合格标本,但应在报告单上注明。
(2) 避免充血和血液浓缩:采血时应动作迅速,尽可能缩短止血带使用时间。用止血带压迫时间最好不超过半分钟,否则将使生化结果升高或下降。
(3) 若病人正在进行静脉输液,不宜在输液同侧手臂采血;若女性病人做了乳腺切除术,应在手术对侧手臂采血。
(4) 采血的体位:体位改变可引起一系列的生理变化,使血液中的许多指标发生改变。一般采取直立位采血,其二标本的测定值比卧位高5 %~15 %。因此,采血时要注意保持正确的体位(坐位或卧位),以及体位的一致性。
(5) 采血时只能向外抽,决不能向静脉内推,以免注入空气,形成气栓而造成严重后果。
(6) 很多生化成分受膳食影响,因此,采血前要确认病人是否空腹。
(二) 动脉采血法
肱动脉、股动脉、桡动脉以及其它任何部位的动脉都可以作为采血点,但多选择肱动脉和桡动脉。在摸到明显搏动处,按常规消毒,左手固定搏动处,右手持注射器,针头成60°角刺入,血液将自动进入注射器内。采血注意事项见血气分析部分。
(三) 真空采血法
双向针的一端插入真空试管内,另一端在持针器的帮助下刺入静脉,血液在负压作用下自动流入试管内。由于在完全封闭状态下采血,避免了血液外溢引起的污染,并有利于标本的转运和保存。标准真空采血管采用国际通用的头盖和标签颜色显示采血管内添加剂种类和试验用途。可根据需要选择相应的盛血试管。
1.普通血清管
红色头盖,采血管内不含添加剂,用于常规血清生化、血库和血清学相关检验。
2.快速血清管
橘红色头盖,采血管内有促凝剂,可激活纤维蛋白酶,使可溶性纤维蛋白变为不可溶的纤维蛋白多聚体,进而形成稳定的纤维蛋白凝块。快速血清管可在5 分钟内使采集的血液凝固,适用于急诊血清生化试验。
3.惰性分离胶促凝管
金黄头盖,采血管内添加有惰性分离胶和促凝剂。标本离心后,惰性分离胶能够将血液中的液体成分(血清或血浆) 和固体成分(红细胞、白细胞、血小板、纤维蛋白等)彻底分开并完全积聚在试管中央而形成屏障,标本在48 小时内保持稳定。促凝剂可快速激活凝血机制,加速凝血过程,适用于急诊血清生化试验。
4.肝素抗凝管
绿色头盖,采血管内添加有肝素。肝素直接具有抗凝血酶的作用,可延长标本凝血时间。适用于红细胞脆性试验、血气分析、红细胞压积试验、血沉及普通生化测定,不适于做血凝试验。过量的肝素会引起白细胞的聚集,不能用于白细胞计数。因其可使血片染色后背景呈淡蓝色,故也不适于白细胞分类。
5.血浆分离管
浅绿色头盖,在惰性分离胶管内加入肝素锂抗凝剂,可达到快速分离血浆的目的,是电解质检测的最佳选择,也可用于常规血浆生化测定和IC U 等急诊血浆生化检测。血浆标本可直接上机并在冷藏状态下保持48 小时稳定。
6.E DT A 抗凝管
紫色头盖,乙二胺四乙酸(E DT A ,分子量292) 及其盐是一种氨基多羧基酸,可以有效地螯合血液标本中的钙离子。螯合钙或将钙从反应位点移去将阻滞和终止内源性或外源性凝血过程,从而防止血液标本凝固。适用于一般血液学检验,不适用于凝血试验及血小板功能检查,亦不适用于钙离子、钾离子、钠离子、铁离子、碱性磷酸酶、肌酸激酶和亮氨酸氨基肽酶的测定及PCR 试验。
7.枸橼酸钠凝血试验管
浅蓝头盖,枸橼酸钠主要通过与医师招聘血样中钙离子螯合而起抗凝作用。适用于凝血实验,国家临床实验室标准化委员会(national com mittee forclinical laboratory standards ,NCCLS)推荐的抗凝剂浓度是3.2 %或3.8 % (相当于0.109 或0.129 mol/L),抗凝剂与血液的比例是1∶9。
8.枸橼酸钠血沉试验管
黑色头盖,血沉试验要求的构橼酸钠浓度是3.2 % (相当于0.109 mol/L),抗凝剂与血液的比例为1∶4 。
9.草酸钾/氟化钠
灰色头盖。氟化钠是一种弱效抗凝剂,一般常同草酸钾或乙碘酸钠合并使用,其比例为氟化钠1 份,草酸钾3 份。此混合物4 mg 可使1 ml 血液在23 天内不凝固和抑制糖分解,它是血糖测定的优良保存剂,不能用于尿素酶法测定尿素,也不能用于碱性磷酸酶和淀粉酶的测定,推荐用于血糖检测。