脑脊液标本由临床医生进行腰椎穿刺采集，必要时可从小脑延脑池或侧脑室穿刺获得。穿刺后应由医生做压力测定， 正常脑脊液压力卧位为0．78～1．76kPa （80～180 mm H2O)；儿童为0．4～1．0kPa （40～100 mm H2O)。任何病变使脑组织体积或脑脊液量增加时，脑脊液压力均可升高。待压力测定后，将脑脊液分别收集于3 个无菌小瓶（或试管)中，每瓶1～2 ml 即可，第1瓶做细菌学检查，第2瓶做化学或免疫学检查，第3 瓶做细胞计数。各种检验所需的脑脊液量见下表。
各种检验所需的脑脊液量
标本采集后要立即送检、化验，一般不能超过1小时。因为放置时间过久，其性质可能发生改变，影响检验结果：
① 细胞破坏或沉淀，与医师招聘纤维蛋白凝集成块，导致细胞分布不均而使计数不准确；
② 细胞离体后迅速变形乃至渐渐消失，影响分类计数；
③ 葡萄糖迅速分解，造成含糖量降低；
④ 细菌溶解，影响细菌（尤其是脑膜炎双球菌)的检出率。采集的脑脊液标本应尽量避免凝固和混入血液。
