血细胞分析在仪器处于正常工作状态下, 血细胞计数结果的准确性取决于样品的质量。现就血细胞分析样品质量的控制谈几点个人经验。
1．样品采集中的控制点
1．1 静脉血样品, 不应在输液、输血同侧肢体上采血。要防止血标本的溶血, 特别是在血液注入容器中不能垂直射入,而应沿试管壁流入,以免产生大量气泡而造成标本溶血。采血完毕, 使血液立即与国家医学网EDTA·2K2抗凝剂混匀, 即将盛血容器轻轻来回颠倒8次进行初始混匀。目的是抑制血小板的聚集,防止血小板发生不可逆性的聚集而使血液凝固;皮肤血样品(曾称为毛细血管血),其采血的整个操作过程中动作要迅速。血液从针刺部位自然流出最佳,混有组织液的第1 滴血弃去。血液流出不畅, 切勿用力挤压, 以免造成组织液混入。血入一次性容器(下称子弹头),血液应立即与EDTA·2K2结晶抗凝剂进行初始混匀, 即将盛血容器先甩三次,然后子弹头朝上,用手指轻轻弹击尖部侧面三次,再将子弹头向下甩三次。用同样弹击、甩的方式和次数,再颠倒二遍混匀。
1．2 血液采集后的其它非颠倒混匀方式,如随便震摇、旋转、弹击和点敲(子弹头)数次,被抑制聚集的血小板解离不充分,会导致白细胞和血小板计数呈假性升高和降低, 或血液与抗凝剂混匀不充分易发生血液凝固;不能图省事, 直接从刚采集到的未抗凝的静脉血从其容器中转移到做血细胞分析的抗凝容器里,否则易造成肉眼看不见的血凝块,而影响血细胞计数的准确性。
1．3 皮肤血样品的盛血容器, 子弹头容量为1.5mL的最佳。笔者实验证实,使用0.5mL的子弹头,样品采集后及时检测,所有的白细胞和血小板检测结果均呈假性升高和降低;若放置10 min后测定,其结果与1.5 mL容量的子弹头立即检测无差异显著性。其原因可能为在容量小的容器中被抑制聚集的血小板因时效短不容易均匀地分布在容器中,故用1.5 mL容量的子弹头为宜。
2 样品分析中的控制点
2.1 正确采集血液是获得准确、可靠实验结果的重要一环,而样品进入仪器分析,则是实验室的关键环节。因此,实验室的操作者必须是专业素质高、负责任的技术人员。
2.2 样品进入仪器分析前, 应对样品再次混匀。目的是使可逆性聚集的血小板团分散成单个血小板,使其它血细胞分布均匀。样品再次混匀方式:静脉血,将盛血容器夹在两手掌心来回搓动8 次,用同样方式和搓动次数,将容器颠倒二遍搓动;皮肤血再次混匀同初始混匀方式。
2.3 静脉血样品及时或不能及时上机分析均应再次混匀。皮肤血样品及时分析只要初始混匀即可上机分析,如不能及时检测,当样品要分析时,应再次按初始混匀方式混匀样品。
3 样品分析后的控制点
3.1 样品进入实验室,一眼就能识别的不合格血样就被拒收。但那些肉眼察觉不到的有核红细胞、红细胞碎片、血小板的“聚集”等影响实验结果的血样,可通过样品分析后,从直方图(以下直方图的文字描述, 为库尔特Ac T diff2 血细胞分析仪的图像特征)和测定数据旁的警告符号*来判断分析样品的质量。
3.2 因采血不顺利, 或采血后未立即进行初始混匀,易发生血小板不可逆性的微凝聚集, 如血细胞计数和血红蛋白测定结果与临床明显不符,应重新采集血样;由血小板可逆性聚集所致,白细胞直方图在三个峰前出现小峰(左边曲线与纵坐标相交),血小板直方图无电子拟合线,仪器有警告提示。通常情况下,当混匀样品时,没有充分将可逆性聚集的血小板团分散成单个血小板,仪器将那些未分散的血小板团误认为小白细胞而计入白细胞数中;在血小板计数时,若团块大于仪器预设的脉冲值,将不被仪器计入,或几个血小板当一个计入,致使影响白细胞和血小板计数的准确性。但红细胞计数,血红蛋白测定不受影响。遇此情况,可将样品放置10 min后重新混匀样品再测,若直方图正常,警告符号消失,可发出报告单,如仍呈现异常直方图,并伴有警告*提示,应考虑其它原因所致,如溶血标本,因红细胞碎片大小不一,血小板直方图拟合线形成阶梯状
,造成血小板计数呈假性升高。重采血样分析,或用手工法复检。
3.3 由血小板可逆性聚集所致,呈现的假性白细胞计数增加和血小板假性减少,其它原因所致的结果异常,应引起操作者的足够重视,不要因样品的质量或人为的误差而误导临床诊断和治疗。
总之,正确的样品采集、混匀是控制血细胞分析样品质量的关键,借助直方图和仪器旗标的提示,对实验样品是否可靠起着重要的监控作用。
