电泳技术临床应用:随着新的电泳技术的出现,各种自动化电泳分析仪问世并相继被引入临床实验室,电泳技术在临床疾病的诊断中正发挥越来越多的作用,特别是为各种体液蛋白质、同工酶等的检测提供了新的手段。1. 血清蛋白电泳 新鲜血清经醋酸纤维薄膜或琼脂糖电泳,染色后,常见白蛋白、α1、α2、β和γ球蛋白5条带。血清蛋白质电冰图谱是了解患者血清蛋白质全貌的有价值的方法,可用为初筛试验随着新的电泳技术的出现,各种自动化电泳分析仪问世并相继被引入临床实验室,电泳技术在临床疾病的诊断中正发挥越来越多的作用,特别是为各种体液蛋白质、同工酶等的检测提供了新的手段。
1. 血清蛋白电泳 新鲜血清经醋酸纤维薄膜或琼脂糖电泳,染色后,常见
白蛋白、α1、α2、β和γ球蛋白5条带。血清蛋白质电冰图谱是了解患者血清蛋白质全貌的有价值的方法,可用为初筛试验。急性炎症或急性时相反应时常以α1、α2 区带加深为特征;妊娠型α1 区带增高,伴有β区带增高;
肾病综合征、
慢性肾小球肾炎时呈现白蛋白下降,α1、β球蛋白升高;
缺铁性贫血时可由于转铁蛋白的升高而呈现β区带增高,而慢性肝病或
肝硬化呈现白蛋白显著降低;γ球蛋白升高2~3倍,显示免疫球蛋白( Ig)多克隆高,甚至可见β~γ桥,还可在γ区呈现细而密的寡克隆区带;单克隆Ig异常症(M蛋白血症)则在电冰区带α~γ区呈现致密而深染,高度集中的蛋白克隆增生区带(M蛋白区带) 。
2. 尿蛋白电泳 尿蛋白电泳的主要目的是在无损伤的情况下,协助临床判断肾脏病变的严重程度。当不能进行肾活检时,尿蛋白电泳结果能很好地协助临床判断肾脏的主要损害。尿蛋白电泳后呈现出中、高分子蛋白区带主要反映肾小球病变,呈现出低分子蛋白区带可见于肾小管病变或溢出性蛋白尿(如本周蛋白) ;混合性蛋白尿可见到各种分子量区带,示肾小球和肾小管均受累及。对临床症状不典型的患者及微量蛋白尿患者的诊断及各种肾脏疾病治疗过程中病情的动态分析也具有很大价值。
3. 脑脊液蛋白电泳 若在脑脊液(CSF)标本中检出寡克隆区带,而其相应血标本中未能检出区带,反映是由中枢神经系统本身合成的Ig,具有重要临床意义。但为保证正确的比较与
药学招聘分析,须将患者血清和CSF在同一天同步进行分析,以论证不同来源的Ig。中枢合成Ig是中枢神经系统疾患的一个重要信号,主要用于
多发性硬化症、
痴呆、
脊髓炎、亚急性脑白质炎、神经性
梅毒等中枢神经系统疾患的诊断和鉴别诊断。
4. 血红蛋
白及糖化血红蛋白电泳 应用电泳法鉴别患者血液中Hb的类型及含量对于贫血类型的临床诊断及治疗具有重大意义。HbA2 增高是β2轻型
地中海贫血的一个重要特征,HbA2 减低见于缺铁性贫血及其他Hb合成障碍性疾病(常见如α2地中海贫血) 。电泳发现异常Hb如HbC、HbD、HbE、HbK和HbS等则可诊断为相应的Hb分子病。在酸性条件下电泳,可将糖化血红蛋白的不同组分HbA1 a,,HbA1 b和HbA1 c分离开来,HbA1 c形成与RBC内
葡萄糖有关,可特异性反映测定前6~8周体内
葡萄糖水平。此外,糖化血红蛋白可对某些患者因HbF增高所造成HbA1 c假性升高作出解释。
5. 免疫固定电泳 可对各类Ig及其轻链进行分型,最常用于临床常规M蛋白的分型与鉴定。一般用于单克隆Ig增殖病、单克隆Ig病、本周蛋白和游离轻链病、多组分单克隆Ig病、重链病、CSF寡克隆蛋白鉴别、多克隆Ig病的诊断和鉴别诊断。
6. 同工酶电泳 临床上用于同工酶或同工酶亚型分析。
(1)乳酸脱氢酶(LD /LDH)同工酶 用琼脂糖凝胶电泳(AGE)法可分离出5种同工酶区带(LD1 ~LD5 ) 。主要用于急性
心肌梗死(LD1 >LD2 )及骨骼肌疾病(LD5 升高)的诊断和鉴别诊断。恶性肿瘤、肝硬化时可见LD5 明显升高,或在胸
腹水中出现一条异常LD6区带。
(2)肌酸激酶(CK)同工酶 采用AGE法可分离出3种CK同工酶。当出现异常同工酶如巨肌酸激酶1 (CK1 ) 、巨CK2 等时,从电泳图谱上很容易发现。CK2MB在心肌梗死早期增加和短时间内达峰值也是心肌再灌注的指征。CK2BB增高见于脑胶质细胞瘤、小细胞
肺癌和胃肠道恶性肿瘤,后者还常有CK2Mt增高。
(3) CK同工酶亚型 指CK2MM亚型(CK2MM1、CK2MM2、CK2MM3 )和CK2MB亚型(CK2MB1、CK2MB2 ) ,常采用琼脂糖凝胶IEF或高压电泳。采用琼脂糖凝胶高压电泳可进行CK同工酶亚型的常规快速分析,用于临床早期心肌损伤的临床诊断与鉴别诊断。主要用于急性心肌梗死的早期诊断,也可用于确定心肌再灌注、溶栓治疗后的病情观察。
(4)碱性磷酸酶(ALP)同工酶 可采用AGE法进行ALP同工酶的常规快速分析。肝外阻塞性
黄疸、转移性
肝癌、肝脓疡和
胆石症时胆汁ALP检出率很高,并伴有肝ALP增加,而
肝内胆汁淤积、
急性肝炎、
原发性肝癌等主要表现为肝ALP增多,大多数不出现胆汁ALP。甲亢、恶性骨损伤、
佝偻病、
骨折、肢端肥大症所致骨损伤等,均引起骨ALP同工酶增加。骨ALP、高分子ALP同工酶对恶性肿瘤骨转移或肝转移的阳性预示值较总ALP高。胃肠道肿瘤、肺癌等恶性肿瘤时出现类肠型ALP。