卫生毒理学电子教材-第九章 外来化合物的免疫毒性作用及其试验方法:第二节 免疫毒理试验中常用的方法

 为鉴定外来化合物对免疫系统的毒性，必须建立一系列灵敏、特异、简便、快速的检测方法，大多数免疫毒理学家认为，要建立一组实验方法来评价免疫毒性。

一、病理学常规检查

淋巴细胞增殖反应试验是测定T细胞和B细胞功能活性的简便方法，重复性也较好。

有许多方法可用来检测体液免疫功能，包括抗体滴度、抗体形成细胞（PFC)及B细胞受体试验等。

抗体形成细胞试验是一种敏感而且常用的方法。通常用的抗原有绵羊红细胞（SRBC)、牛血清白蛋白（BSA)、卵白蛋白（0valbumin)、脂多糖（LPS)等。

细胞免疫功能主要由T细胞完成，细胞免疫担负着迟发型变态反应、移植排斥、肿瘤免疫等。

用来测定细胞免疫功能的方法有体内法（迟发型变态反应、移植物抗宿主反应、皮肤移植排斥反应)和体外法（淋巴细胞增殖、T细胞毒性及淋巴因子的产生)。

体内检测迟发型变态反应的方法应用较广，在一般情况下迟发型变态反应可以反映机体细胞免疫状况。原理是当致敏的T细胞再次接触相应的抗原后，就能引起局部的致敏淋巴细胞释放出多种淋巴因子，导致以单核细胞浸润为主的炎症反应，表现为皮肤红肿硬结。这种反应一般在抗原注射后24～48小时可以见到。

在人体检测迟发型变态反应可采用皮试法。皮试法中所用的抗原有特异性病原微生物性抗原，如结核菌素（OT)、白喉病毒、腮腺炎病毒等；还有非特异性抗原，如二硝基氯苯、二硝基氟苯及植物血凝素等。结果判定是根据硬结的纵横直径平均值，一般在5mm以上为阳性反应。

巨噬细胞在免疫反应中具有很重要的作用，它不仅有非特异性吞噬功能，还参与细胞免疫和体液免疫。巨噬细胞有多种功能，例如吞噬作用、胞内杀伤、抗原摄取和处理、产生干扰素以及对感染细胞或恶变细胞的杀死和溶解作用等。

机体在接触化学物质后，可改变其对细菌、病毒、寄生虫及可移植肿瘤和自发肿瘤的抵抗力。一般认为，B细胞缺损，机体对细菌敏感性升高；T细胞缺损，则对病毒、寄生虫、肿瘤敏感性增高。这种试验是在动物身上进行的整体试验。

   1．肿瘤细胞攻击试验 本试验用纯系小鼠观察机体对同系基因的肿瘤细胞的抵抗力。攻击所用的肿瘤细胞量是使10%～20%正常动物发生肿瘤的量。观察指标为肿瘤发生率、死亡率、发生肿瘤的平均潜伏期、肿瘤大小、结节数目以及平均死亡时间等。