（一)标本的采集
应符合以下几个原则：①注意无菌操作，尽量避免杂菌污染；②在患者不同病程，根据不同病原菌在体内的分布和排出部位，采取不同的标本；③应在发病急性期和使用抗生素之前采集；④尽可能采取病变明显部位的材料；⑤标本必须新鲜，尽快送检；⑥多数菌冷藏运送，少数菌需保温；⑦标本应做好标签，化验单上填写检验目的、标本种类和临床诊断。
（二)病原菌的检验程序
1．直接涂片镜检 凡在形态和染色性上具有特征的病原菌，直接涂片染色后镜检有助于初步诊断。
2．分离培养 原为无菌部位采取的血液、脑脊液等标本，可直接接种至营养丰富的液体或固体培养基；从正常菌群存在部位采取的标本，应接种至选择或鉴别培养基。同时要注意满足气体的要求。
3．生化试验 如肠道杆菌包括多个菌属，可利用不同基质进行生化试验予以区别。
4．血清学试验 采用含有已知特异性执业药师抗体的免疫血清与分离培养出的未知纯种细菌进行血清学试验，可以确定病原菌的种或型。
5．动物试验 主要用于分离、鉴定病原菌，测定菌株产毒性等。
6．药物敏感试验 对临床选择用药有指导意义。
7．分子生物学技术 应用核酸杂交和PCR技术检测病原菌核酸。基因芯片技术已成为研究开发热点。
用已知的细菌或其特异性抗原检测患者血液中有无相应特异抗体和其效价的动态变化，可作为某些传染病的辅助诊断，主要适用于抗原性较强的致病菌和病程较长的感染性疾病。
血清学诊断试验最好取患者急性期和恢复期双份血清标本，当后者的抗体效价比前者升高≥4倍者方有意义。
表7-1 血清学试验种类与应用
| 血清学试验 | 举例 |
| 凝集试验 直接凝集试验 乳胶凝集试验 冷凝集试验 沉淀试验 对流免疫电泳 补体结合试验 中和试验 | 检查流感嗜血杆菌的抗体 支原体性原发性非典型肺炎 流行性脑膜炎 风湿热（抗O试验) |
1．特异性免疫获得方式 ①主动免疫：通过患病、隐性感染获得自然感染，或给机体接种疫苗（vaccine)、类毒素（toxoid)进行人工免疫www.lindalemus.com/zhuyuan/。②被动免疫：通过胎盘、初乳等自然免疫获得抗体，或是给机体注射抗毒素（antitoxin)等进行人工免疫。
2．人工免疫的概念和临床常用制剂
①人工主动免疫（artificial active immunity)：是将疫苗或类毒素等抗原物质接种人体，使机体产生特异性免疫力的一种措施。疫苗可分为死疫苗、减毒活疫苗、基因工程疫苗、核酸疫苗，从功能上又可分为预防性疫苗和治疗性疫苗。免疫出现时间慢（2～4周)，维持时间长（数月～数年)，主要用于预防。
②人工被动免疫（artificial passive immunity)：是注射含有特异性抗体的免疫血清或细胞因子，使机体立即获得特异性免疫，因而作用及时，但维持时间短，仅2～3周，主要用于治疗或紧急预防。常用的生物制品是抗毒素、抗菌血清、胎盘球蛋白、丙种球蛋白和细胞免疫制剂。
【A型题】
1.有关“病原菌检测的标本采集”的叙述，哪一项是错误的：
A.最好在使用抗生素前采集标本 B.采集的标本应尽快送检
C.应注意无菌操作D.采集的标本应在低温下保存
E.按病变部位和病期决定采集不同的标本
2.目前可用类毒素进行预防的疾病是：
C.破伤风与结核病 D.白喉与破伤风
E.百日咳与白喉
3.抗毒素：
A.为外毒素经甲醛处理后获得
B.用于人工主动免疫
C.可中和与易感细胞结合的外毒素的毒性作用
D.可中和内毒素的毒性作用
E.使用原则是早期、足量、防过敏反应
4.类毒素：
A.为内毒素经甲醛处理后获得 B.能中和外毒素的毒性作用
C.可刺激机体产生抗毒素D.为抗毒素经甲醛处理后获得
E.可用于人工被动免疫
5.类毒素:
A.有抗原性，有毒性 B.无抗原性，有毒性
C.有抗原性，无毒性 D.无抗原性，无毒性
E.仅有半抗原性，无毒性
6.对细菌种属的鉴定，下列哪一项不是必须的:
A.形态染色观察 B.分离培养
C.生化反应D.血清学试验
E.药敏试验
7.直接涂片镜检:
A.不能快速诊断细菌感染
B.适用于所有细菌感染疾病的初步检查
C.只适用于形态和染色性上具有特征的病原菌
D.其结果必须结合临床表现方有诊断价值
E.以上都不是
8.哪一项不能获得有效的特异性免疫:
A.新生儿吸吮初乳 B.注射丙种球蛋白
C.接种卡介苗D.破伤风病愈后
E.流脑流行期无症状感染者
9.使用时要注意防止发生Ⅰ型变态反应的制剂是:
A.干扰素 B.类毒素
C.抗毒素 D.丙种球蛋白
E.灭活疫苗
10.灭活疫苗优于减毒活疫苗表现在：
A.免疫效果较好且持久 B.接种次数及剂量较少
C.可产生局部免疫作用 D.疫苗保存期长,易于运输
E.注射的局部和全身性副反应轻微
11.诊断风湿热的抗O试验属于：
A.中和试验 B.沉淀试验
C.补体结合试验 D.直接凝集试验
E.乳胶凝集试验
12.有关“核酸疫苗”的叙述，哪一项是错误的：
A.包括DNA疫苗和RNA疫苗B.热稳定性差
C.免疫维持时间长 D.诱发机体产生细胞免疫和体液免疫
E.由免疫原编码基因与载体(如质粒DNA)组成
【X型题】
13.有关“疾病━血清学诊断方法”的组合，哪几项是正确的:
A.伤寒━肥达反应B.风湿病━抗“O”试验
C.斑疹伤寒━外斐反应 D.结核病━结核菌素试验
E.梅毒━USR试验
14.注射或接种哪一项而获得免疫的方式称为人工被动免疫。
A.破伤风抗毒素（TAT) B.卡介苗（BCG)
C.百日咳疫苗 D.脊髓灰质炎疫苗（OPV)
E.免疫球蛋白
15.下述哪一项检查能协助临床诊断:
A.脓汁涂片找到革兰阳性葡萄球菌 B.咽拭子涂片找到革兰阴性双球菌
C.脑脊液涂片找到革兰阴性杆菌 D.痰标本涂片找到抗酸杆菌
E.淤斑血涂片找到革兰阴性双球菌
16. 有关“减毒活疫苗与灭活疫苗”的叙述，哪几项是错误的：
A.灭活疫苗需接种多次，减毒活疫苗一般只需接种一次
B.灭活疫苗的免疫效果优于减毒活疫苗
C.灭活疫苗不能诱导机体产生SIgA，而减毒活疫苗可诱导产生
D.灭活疫苗的保存期比减毒活疫苗长
E.灭活疫苗的免疫力维持时间比减毒活疫苗长
17.人工被动免疫的特点包括:
A.免疫物质为类毒素 B.免疫物质是丙种球蛋白
C.免疫物质是抗毒素 D.可用于紧急预防
E.主要用于治疗
18.利用微生物的毒力变异制成的活疫苗不包括：
A.卡介苗 B.麻疹疫苗
C.流脑疫苗 D.脊髓灰质炎口服疫苗
E.乙型肝炎疫苗
[思考题]
19．对一疑似伤寒（或流行性脑脊髓膜炎)的患者，你如何进行微生物学检查？
20．试述核酸疫苗、亚单位疫苗、灭活疫苗和减毒活疫苗的主要区别。
【A型题】
1.D 2.D 3.E 4.C5.C
6.E 7.D 8.D 9.C 10.D
11.B 12.B
【X型题】
13.A B C D 14.A E 15.A C D E
16.BE 17.B C D E 18.C E
【题1】 标本不能及时送检时一般应置于4℃保存，但少数不耐寒冷的脑膜炎球菌、淋球菌等要保暖，否则将不能分离出该菌。
【题7】 凡是在形态和染色性上具有特征的致病菌，直接涂片染色后镜检有助于初步诊断。在少数情况下，对形态无特征的细菌也可用免疫荧光抗体染色镜检进行快速鉴定，其结果均必须结合临床表现方才有诊断价值。
