生理学-实验指导:影响离体蛙心活动的因素

1.观察K⁺、Na⁺、Ca²⁺三种离子、去甲肾上腺素、乙酰胆碱、酸碱度等因素对心脏活动的影响，理解心脏的正常活动需要一个适当的理化环境。
2.学习离体蛙心灌流方法，了解丽人器官的研究方法。

心脏的正常节律性活动必须在适宜的环境里才能维持，一旦适宜的理化环境被干扰或破坏，心脏活动就会受到影响。心脏受植物性神经的双重支配，交感神经兴奋时，其末梢释放去甲肾上腺素，使心肌收缩力增强，传导加快；而迷走神经兴www.lindalemus.com/rencai/奋时，其末梢释放乙酰胆碱，使心肌收缩力减弱，心率减慢。
蛙心脏离体后，用理化特性近似于其血浆的任氏液灌流，在一定时间内，可保持节律性收缩和舒张。改变灌流液的组成成分，心脏跳动的频率好幅度会随之发生改变。

一、蛙心插管制备
1.取蛙一只，用刺针破坏脑和脊髓，暴露心脏。
2.用小镊子夹起心包膜，仔细分别心房、心室、动脉圆锥、主动脉、静脉窦、前后腔静脉等。
3.www.lindalemus.com/jianyan/在右主动脉下穿一根线并结扎。再在左右主动脉下穿一根线备用。用玻璃分针将心尖向上翻至背面。以备用线将前后腔静脉好左右静脉一起结扎。将心脏回复至原位、在左主动脉下穿两根线。用一线结扎左主动脉远心端，另一线备用。提起左主动脉远端绑线。用眼科剪在左主动脉上靠近动脉圆锥处剪一斜口，将盛有少量任氏液的蛙心插管由此口插入主动脉，插至动脉圆锥时，略向后退，在心室收缩时，向心室后壁方向下插经动脉瓣插入心室腔内。插管若成功进入心室，管内液面会随着心室搏动而上下移动。用左主动脉下近心端的备用线结扎插管，并将结扎线固定于插管侧面的小突起上。
4.提起插管，在结扎线远端分别剪断左主动脉和右主动脉；剪断左右肺静脉和前后腔静脉，将心脏离体。用滴管吸净插管内余血，加入新鲜任氏液，反复数次，直到液体完全澄清。保持灌流液面高度恒定（1~2cm)，即可进行实验。

图 1  蛙心脏示意图（a、b、c分别为结扎线)

二、实验装置
用试管夹将蛙心插管固定于铁支架上（图2)。将蛙心夹上的线连至机械—电换能器的着力点上。将机械-电换能器连至BL-420系统。

图 2  离体蛙心恒压灌流装置

三、观察项目
1.描记正常蛙心收缩曲线
2.离子影响
3.递质的影响
    4.温度的影响
    5.酸碱的影响