临床免疫学及检验授课教案-理论课教案:酶免疫技术

授课内容(章，节)

题 目

第二十章 酶免疫技术

授课教师单位

广医附一院

教研室

检验科

职称

主任技师

授课方式

大课面授

授课时数

2

授课对象 检验系2003本科班

授课时间

2006.09.19

授课地点

12-2A

采用教材版本

《临床免疫学检验》吕世静主编

教学目的与要求：

1  掌握：酶免疫测定的基本原理，ELISA技术类型，试剂

和材料，ELISA技术要点

2 熟悉：酶标抗体的制备，常用酶和底物的理化性质，方

法的标准化，酶标仪的使用

3  了解：酶免疫技术的发展和应用。

授课内容(要点)

时间

分配

1  酶免疫技术和分类概念   （10 min)

2  酶免疫测定的基本原理，ELISA技术类型，试剂和材料，ELISA技术要点  （40 min)

3 酶标抗体的制备，常用酶和底物的理化性质，方法的标准化，酶标仪的使用。  （20 min)

4 斑点-ELISA、BAS-ELISA 、免疫层析法和免疫印迹法。（5 min)

5 www.lindalemus.com/shouyi/ 酶免疫技术的发展和应用。  （5 min) 

2学时

讲课重点和难点（采用何种方式或方法来解决)

重点：酶免疫测定的基本原理，ELISA技术类型，试剂和材

料，ELISA技术要点

难点：酶免疫测定的基本原理

介绍学生阅读有关参考文献，增加知识面，拓展视野，加深理解，易于记忆。

1)周光炎.免疫学，第六版.北京：人民卫生出版社，2002

2)吴健民.免疫学检验——理论与临床.北京：人民卫生出版社，2003

3)吴世静.免疫学检验，第二版. 北京：人民卫生出版社，2003

教学过程设计：（授课中对以下内容采取的措施)

1  采用提问的方式，复习标记免疫技术的概念和分类，带出酶免疫技术概念和分类。

2  应用板书写出反应方程式，以解释酶免疫均相法和异相法，让学生理解两种方法的异同点。

3  利用动画演示均相法的检测原理：均相酶免疫放大法和克隆酶法，形象展示两种方法的异同点。

4  通过图片展示异相法中ELISA法所必备的试剂，用流程图解释ELISA操作流程，用表格讲授酶与作用的底物及显色的关系。

5  用板书、动画解释免疫吸附剂、酶标记抗体的制备过程，在讲授过程中，应详细解释每一步的影响因素与注意事项，例如包被的条件、封闭的作用等等。

6 利用直观图、动画等多媒体技术，解释ELISA的检测原理，本内容是学生撑握的难点，重点要展示微观反应原理。

7 利用视频技术，展示ELISA检测技术的操作过程和检测流程。

8 用实际临床例子，讲解ELISA标准操作程序及各个环节的影响因素。

9 简单介绍斑点-ELISA、BAS-ELISA 、免疫层析法和免疫印迹法。

10 简单介绍酶免疫技术的进展，例如酶免疫测定仪及自动化进展。

2．启发引导学生思维：

1)ELISA方法类型、测定原理与荧光免疫技术中的异同点。

2) 提问学生：荧光免疫技术中荧光素与抗体之间的反应模式。比较ELISA方法中酶标记抗体的制备的异同点。

3) 学生在充分理解EILSA反应原理及特点的基础上，引导学生设计临床测定不同标志物的方法。

4)针对不同的ELISA反应类型，根据其反应原理，临床中如何防止假阳性和假阴性？

3．采用英语专业词汇：

1) 酶免疫技术（Enzyme Immunoassay,EIA)

2) 酶免疫组织化学技术（Enzyme Immunohistochemistry Techenique, EIHCT)

3)辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)

4)碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)

5)b－半乳糖苷酶(b－galactosidase , b－Gal)

6) 酶增强免疫测定技术（enzyme－multipled  Immunoassay,EMIT)

7) 克隆酶供体免疫分析技术（cloned enzyme donor Immunoassay,CEDID)

8) 酶联免疫吸附试验（enzyme－Linked Immunosorbent Assay,ELISA)

9)膜载体的酶免疫测定技术（Membranced-Based Enzyme Immunoassay)

10) 免疫渗滤试验（Immunofiltration assay,IFA)

11) 免疫层析试验（Immunochromatography assay,ICA)

12) 免疫印迹法（Immunoblotting test,IBT)

13) 生物素－亲和素系统酶联免疫吸附试验（Biotin-Avidin System

ELISA)

14) 酶免疫测定的应用（Application of Enzyme Immunoassay)

4．指导学生自学：

1) 自学斑点-ELISA、BAS-ELISA 、免疫层析法和免疫印迹法的原理、影响因素及临床应用。

2)自学酶免疫www.lindalemus.com/kuaiji/组化技术的原理及技术类型。

3)自学常用酶和底物的选择。

5．学科进展内容：

 简单扼要介绍酶在自动化测定中（化学发光)的应用。

课堂提问设计：

1 结合学生对荧光免疫的理解提问：酶免疫技术和荧光免疫技术的基本原

理？

2 结合学生对荧光标记抗体制备的理解提问：两种酶标记抗体的制备方法

的异同。

3 讲授ELISA技术类型时，提问荧光免疫反应的技术类型，两者进行对比。

教师与学生互动的设计：

讲授与提问结合，以临床实例举例说明问题，由浅入深，引导学生，提高学生学习兴趣，调动学生学习积极性。

教学方法与手段（采用何种直观教具和数量)(请打√)

板书设计

1  酶标记免疫技术：Ag+Ab^E-----AgAb^E―――测量E，

或：Ag^E+Ab-----Ag^EAb―――测量E，

2     

免疫吸附剂的制备――抗体固定原理

  封闭的原理

   Y  Y 

3  钩状效应的原理及图示

√CAI课件 √动画  √视频   √网络

其它：

课时具体安排：

1 酶免疫技术概念、分类，均相免疫技术的概念分类和原理，8min

2 酶免疫测定的基本原理，ELISA技术类型和反应原理，影响因素20min。

3 ELISA的技术要点：免疫吸附剂、酶标记抗原或抗体、反应条件的选择，

20min

4操作标准化: 加样、保温、洗涤、比色和影响ELISA测定的因素20min。

5斑点ELISA、免疫印迹法、重组免疫结合试验、亲和素-生物素系统的原

理、方法类型及影响因素。12min

教学改革措施（授课形式、课堂提问、思考题、复习提纲、测试题)

1)面授与提问结合，强调须掌握和熟悉的内容，可课后给予思考题及测试题。

2)建议学生上网，通过我们自行制作的网络课件，加深对课程内容的理解。

3)建议学生上网，通过我们的网络课件中的“测评系统”进行自我测评，通过测

评考核学生自己对课程内容的掌握程度。

4)对尚未理解的内容，学生可在网上直接进行提问，教师可在某时间段进行问题

解答，通过师生互动，掌握课程内容。

辅导的问题与难点：

1酶免疫技术各类型的反应原理。

2 ELISA试剂制造过程对结果的影响。

备课主要参考资料（图书、文献)：

1)周光炎.免疫学，第六版.北京：人民卫生出版社，2002

2)吴健民.免疫学检验——理论与临床.北京：人民卫生出版社，2003

3)吴世静.免疫学检验，第二版. 北京：人民卫生出版社，2003

授课教师对此次授课的自我评价：

本课是临床免疫检验课程中基础理论的主干课，要求教师有较扎实标记免疫技术理论基础和临床应用经验。此次讲授自己能紧紧抓住酶免疫技术特点这一主线，重点放在反应原理和临床应用的讲授上。通过多媒体中的图片、动画、视频播放等更形象地展示抗原抗体反应的微观过程，通过彩图及流线图更清晰地讲解ELISA的操作过程和影响因素。最后，结合临床经验介绍实际项目的检测。

讲授过程逻辑性强，条理性好，语言表达清晰，能适当介绍相关的专业英语词汇。在基础理论讲授的同时，向学生介绍临床实际检测中结果的判断及临床用药情况对ELISA检测的影响，溶血标本、细菌污染标本对结果的影响，以及目前EILSA检测项目中常涉及到的医疗法律方面的知识等内容，从而扩大学生的知识面。在授课形式上，PPT结合多媒体播放及适当的板书有机的结合，使内容更形象、更生动、更具体，学生更易于理解。同时检验学生进行网络学习，加深对课程内容的理解。

学生评价：

条理清楚,逻辑性强,讲授深入浅出,能将晦涩难懂的内容讲授得通俗易懂.讲课形式生动活泼,并结合临床实际,使学生更加容易理解.加入新进展内容,扩大知识面。

教研室主任评价：

教案书写要求：文字通畅，书写工整或电脑打印。