附2： 广州医科大学第一临床学院
实验（含诊断学、外科学总论)带教教案
| 教研室 | 临床免疫检验 | 课程 名称 | 免疫学及检验 | 学时 | 4 | 检验专业2003 级 1、2、3班 | ||||
| 带教时间 | 2006 年11 月 16 日---2006 年 11月17 日 | 教师 姓名 | 王慧 | 职称 | 主管技师 | |||||
| 实检（见习)项目 | 免疫印迹检测ENA抗体 | |||||||||
| 本次实验 （见习) 目的、 要求 | 1．掌握免疫印迹法原理、ENA多肽抗体测定的临床意义 2、熟悉ENA多肽抗体测定的操作及结果判断 | |||||||||
| 内容与安排 | 学时 | |||||||||
| 一、介绍本次实验、见习的重点及安排 （实验课应包括：1、实验标本的采集，2、实验操作步骤， 3、实验操作过程注意事项，4、实验结果的评价及临床意义) 1、提问：什么是免疫印迹试验？什么是ENA？什么是ENA抗体？ www.lindalemus.com/Article/2、复习相关内容：免疫印迹试验的原理-典型的印迹实验包括三个步骤： 3、免疫印迹法检测ENA的原理：将待检血清加在硝酸纤维膜上，待检血清中存在的抗ENA抗体分别与硝酸纤维膜上的相应抗原区带结合，当再加入酶标记抗人IsC抗体后形成抗原—抗体-酶标记抗体复合物，再加入酶的底物，出现显色反应，凡有抗ENA抗体与膜上抗原结合的位置，均会因酶促反应而显色。参照此时抗原区带的分子量及各区带的相对位置，可辨读出各特异性抗ENA抗体。 4、器材与试剂 5、操作：配制洗涤液→加样→混匀→置37度温箱水浴→洗涤→加酶结合物→置37度温箱水浴→洗涤→显色置37度温箱水浴→洗涤→终止显色 6、注意事项 7、结果判断 8、ENA抗体区带显色及意义 （1)抗U1RNP抗体：多见于混合性结缔组织病。 （2)抗Sm抗体：抗Sm抗体是SLE的特异性标志之一。 （3)抗SS-A、抗S会计资格S-B抗体：主要见于SS。 （4)抗Jo-1抗体：PM和DM的标志性抗体。 （5)抗Rib抗体：SLE的标志性抗体 （6)抗Scl-70抗体： PSS的标志性抗体 9、方法学评价 11、学生分组试验 二、讨论思考题： 1、为何IBT具有高度的特异性和敏感性？ 2、如何正确判断ENA多肽抗体类型，为什么？ 三、小结要点 1、实验操作情况 2、结果判断时需注意带型与显带位置相结合进行 四、布置学生作业内容 1、书写实验报告(包括：实验目的、原理、器材和试剂、操作步骤、注意事项、、方法学评价、实验结果、结果分析及结论、讨论) 2、思考题 五、下次实验（见习)课预习范围及后续程介绍 下次实验课内容为：免疫荧光试验等(电教) 预习内容：什么ANA？ | 4学时 | |||||||||
| 教案制定时间： 2006 年 月 日 带教老师签名：王慧 | ||||||||||
| 专业主任审阅意见； 签名： 年 月 日 | ||||||||||
