附2： 广州医科大学第一临床学院
实验（含诊断学、外科学总论)带教教案
| 教研室 | 临床免疫检验 | 课程 名称 | 免疫学及检验 | 学时 | 4 | 检验专业2003 级 1、2、3班 | ||||
| 带教时间 | 2006 年10月12 日---2006 年 10月 13 日 | 教师 姓名 | 王慧 | 职称 | 主管技师 | |||||
| 实检（见习)项目 | ELISA检测乙肝两对半 | |||||||||
| 本次实验 （见习) 目的、 要求 | 1．掌握ELISA法检测“二对半”的原理、操作过程及注意事项 2．熟悉检测“二对半”的临床意义。 | |||||||||
| 内容与安排 | 学时 | |||||||||
| 一、介绍本次实验、见习的重点及安排 （实验课应包括：1、实验标本的采集，2、实验操作步骤， 3、实验操作过程注意事项，4、实验结果的评价及临床意义) 1、简介什么是“二对半”，为什么不检测HbcAg？ 2、检测试剂盒的组成：主要介绍ELISA法的3种必备试剂，同时复习与理论相关内容 必备试剂 ① 固相抗原或抗体------免疫吸附剂 3、实验前准备：配制洗涤液 4、加样 5、温育 6、洗涤 7、显色 8、结果判断：比色法、目测法 9、注意事项： 1)标本的采取和保存：大部分ELISA 检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，，溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。 抗凝不完全的标本因纤维蛋白原的干扰而造成假阳性，建议尽量不用抗凝血尤其是肝素抗凝剂。 2)加样：加样时应将所加物加在ELISA 板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出。 3)保温：为避免蒸发，板上应加盖，也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔，反应板不宜叠放，以保证各板的温度都能迅速平衡。 4)洗涤：。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或 抗体结合的物质，以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。 10、临www.lindalemus.com床意义
10、学生分组试验 二、讨论思考题： 1、底物A、B液成分？显色原理？ 2、ELISA试验中，什么是钩状效应？为什么HbsAg含量高会造成假阴性结果？ 3、ELISA试验中哪些因素会造成结果出现假阴性？哪些因素会造成结果出现假阳性？ 3、ELISA检测“乙肝二对半”临床九种常见模式的临床意义？ 三、小结要点 1、实验操作情况 2、注意洗涤要充分，拍板要干净 四、布置学生作业内容 1、书写实验报告(包括：实验目的、原理、器材和试剂、操作步骤、注意事项、、方法学评价、实验结果、结果分析及结论、讨论) 2、思考题 五、下次实验（见习)课预习范围及后续程介绍 下次实验课内容为：循环免疫复合物的检测 预习内容：什么是III型变态反应？ | ||||||||||
| 教案制定时间： 2006 年 月 日 带教老师签名：王慧 | ||||||||||
| 专业主任审阅意见； 签名： 年 月 日 | ||||||||||
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