实验7 强心苷对离体蛙心的影响
[目的]
学习离体蛙心灌注法，观察强心苷对离体蛙心收缩强度、频率和节律的影响以及强心苷和钙离子的协同作用.
[原理]
青蛙或蟾蜍等两栖类动物的离体心脏在一定条件下能存活较长时间，适用于观察药物对离体心脏的作用：因强心苷对衰竭心脏作用明显，可以利用低钙降低离体蛙心的功能，以观察药物的作用。
[材料]
1．动物：青蛙或蟾蜍，70g以上。
2．药品： 任氏液；低钙任氏液 (所含CaCl2量为—般任氏液的1／4，其他成分不变)；5％洋地黄溶液(或0.1mol／L毒K溶液);1％氯化钙溶液
3．器材：BL—420生物机能实验系统，手术器械，蛙板，探针，斯氏蛙心插管，
蛙心夹，双凹夹，长柄木夹，铁支架，滴管，丝线
[方法]
1．启动电脑，确认USB接口已经连通，打开BL-420生物机能实验系统软件，在实验系统的1信号通道上连接张力换能器，在“输入信号”下拉菜单中选择“l通道”的“张力”。
2．取蛙或蟾蜍一只，从枕骨大孔插入探针破坏大脑和脊髓，仰位固定于蛙板上；依次剪开胸部皮肤，剪除胸部肌肉及胸骨www.lindalemus.com，打开胸腔，剪破心包膜，暴露心脏。
3．结扎右主动脉，在主动脉弓下穿一线，打一松结备用。在左主动脉上朝向心端剪一“V”形口，插入盛有任氏液的蛙心插管。通过主动脉球转向左后方，同时用镊子轻提动脉球，向插管移动的相反方向拉即可。
4．使插管尖端顺利进入心室。看到插管内的液面随着心脏的搏动而上下波动后， 将松结扎紧、固定，剪断两根动脉。持插管提起心脏，用线从静脉窦以下把其余血管一起结扎，在结扎处下方剪断血管，使心脏离体。用滴管吸去插管内的血液，并用任氏液连续换洗直至无血色，插管内保留1.5ml左右的任氏液。将蛙心插管固定于铁支架上。
5．用带有长线的蛙心夹夹住心尖，将长线连于张力换能器，记录一段正常心脏搏 动曲线后，依次换加下列药液。每加一种药液后，密切注意心脏收缩强度、心率、房室收缩是否一致等方面的变化。
(1)换入低钙任氏液。
(2)当心脏收缩明显减弱时，向插管内加入5％洋地黄溶液(或0.1%的毒K溶液)0.2ml
(3)当作用明显时，再向插管内加人1％www.med126.com的氯化钙溶液2～3滴。
[结果]
剪贴或复制心脏的收缩曲线，图下注明加药、换药、心率、房室收缩是否一致、心室体积变化等方面的说明。分析实验结果。
[注意事项]
1.制备标本时，应按指导试探着插管，尽量避免损伤心脏(包括静脉窦)。
2.勿混用滴加试剂的试管；加试剂应由少到多，作用不明显再补加；加后立即用滴管搅匀，使之迅速发挥作用；出现明显效应后，应立即吸出全部灌流液，并以新鲜任氏液换洗，直至恢复正常。
3.随时滴加任氏液于心脏表面，使之保持湿润状态。
4.固定换能器时应稍向下倾斜，以免自心脏滴下的水流入换能器内造成短路。
5．本实验以用青蛙心脏为好：因蟾蜍皮下腺体中含有强心苷样物质，其心脏对强心苷较不敏感。
6．开胸不可太大，以防止腹腔内脏翻出：
7．在剪开左侧主动脉前，应先用蛙心插管的细端尖置动脉球处，与动脉平行来选 择适宜的剪口处，以免剪口过高或过低：
[思考]
1.保证记录连续，及时在曲线上加以注释，分析各现象产生分原因。
2.分析有的蛙心标本套管内液面升降不明显的原因并提出相应的对策。
3.实验过程中套管内液面为什么每次都应保持一定的高度？
4.高Ca2+任氏液与肾上腺素引起的心脏活动变化有何不同？为什么？
