实验性质：综合性实验
实验学时：4学时
实验分组人数：4~5人
（一)实验目的
1 复制实验性肺水肿； 通过实验了解肺水肿的表现，加深对水肿发生机制的认识；2 通过本实验，加强与缺氧、呼吸衰竭等内容的联系。
（二)实验材料
1． 实验动物 家兔
2．实验仪器
（1) BL－420E+系统⑵ 天平 ⑶ 婴儿称 ⑷ 听诊器
3． 实验用药 1％普鲁卡因、肺素溶液（1250/ml)、20％磺基水杨酸溶液，生理盐水。
4． 器械 吸管、载玻片、滤纸若干、气管插管、www.lindalemus.com/sanji/动、静脉插管，急性手术器械一中国卫生人才网套（动脉夹2个、手术刀1把、止血钳10把、组织剪刀1把、线剪1把、眼科剪刀1把、剪毛剪刀1把、镊子4把、注射器1ml 3个、5ml 2个、粗细丝线各1轴)。
（三)实验步骤
实验组Ⅰ
1． 取家兔一只，称体重后背位固定，1％普鲁卡因局部麻醉，切开颈部皮肤，按常规手术操作，分离气管、左侧颈总动脉、右侧颈总静脉。插入气管插管，由耳缘静脉注入肝素溶液（1250U/kg)插入动脉导管连接血压描记装置。用动脉夹阻断右颈总静脉近心端，使之充盈，结扎远心端，靠近心端处剪口，插入导管以备输液。
2． 输液前观察血压、呼吸曲线，取血做血气分析、并听诊肺部呼吸音。然后通过静脉输入37℃～38℃生理盐水，输入量按100ml/kg，输液速度为180～200滴/min。然后速度加快，几乎呈柱状，直至肺水肿形成。
3． 注意观察呼吸、血压的变化及气管插管内是否有粉红色泡沫样液体溢出， 并听诊肺部有无湿性啰音。当肺水肿出现时，用小吸管吸取少量气管插管内溢出之水肿液，备作水肿液蛋白质定性实验。同时取血做血气分析。然后，处死动物，夹闭气管，打开胸腔，观察胸腔内及心包腔内积液，将心包腔内积液挤至一端，用注射器抽取少量积液备用。然后将连接胸壁的组织离断，同时在夹闭气管的止血钳上端剪断气管，（注意防止水肿液流出)提起心肺切断腔静脉及主动脉，去除胸腺及周围组织，在肺动脉与肺静脉的近肺端用细线结扎，剪断血管（结扎线留在肺侧)以离断心脏。用粗线在切断气管的分叉上1cm处进行结扎，于结扎线上端切断气管。用滤纸吸去肺表面的液体，称重，计算肺系数。肉眼观察肺大体形态的改变。切开肺脏、注意有无泡沫样液体流出。
对气管插管中溢出的水肿液，腹腔积液进行蛋白质定性试验，以了解微血管通透性的改变。
实验组Ⅱ
实验步骤与实验组Ⅰ不同之处是自颈总静脉输入生理盐水（输液量按100ml/kg，输液速度为180～200滴/min )待输入量完毕时将肾上腺素入壶（按肾上腺素0.45ml/kg)。其余步骤与实验组Ⅰ相同。
（四)注意事项
1． 输液管道内一定要将空气排净，避免气体栓塞。
2． 输液速度要保证180～200滴/min，以避免出现不典型肺水肿，同时也拖延实验时间。
3． 测血气时注意血液与空气隔绝，及时用胶塞封住针头。
4． 解剖取肺时，注意勿损伤肺表面并避免挤压肺组织，以防水肿液流出，影响肺系数值。肺系数＝肺质量（克)/体质量（㎏) 正常值4.1～5
5． 取心包液和腹水时，不要刺破血管，尤其取腹水时要做正中切口，否则影响蛋白测定值。
附录
水肿液蛋白质定性-------磺基水杨酸法
原理：磺基水杨酸是一种生物碱试剂，在酸性环境时可与蛋白质的氨基结合形成不溶于水的盐类。
试剂：20%磺基水杨酸溶液
操作：取载玻片三张，于每张玻片两端滴上需测的水肿液2~3滴。向玻片一端的水肿液中加入20%磺基水杨酸1滴，另一端加1滴生理盐水，二者进行比较，如水肿液变混浊即为阳性，清析透明为阴性。
(五)思考题
1． 大量快速输入生理盐水发生急性肺水肿的机制？
2． 临床上对心衰患者在输液时应注意什么？
3． 急性肺水肿与缺氧、呼吸衰竭等章节的联系及发生机制？
4． 水肿液蛋白测定的意义？
（丁春华)
