动物实验基本操作
目的和原理 生理实验中经常用蟾蜍作为实验对象，本实验目的熟悉蟾蜍坐骨神经一腓肠肌标本的制备。
实验对象 蟾蜍
实验器材和药品 蛙类手术器械一套、棉线、烧杯、滴管、任氏液。
实验项目
坐骨神经腓肠肌标本制备
（一)破坏脊髓左手握住蟾蜍，用食指下压口吻端使头前俯(图1)，右手持脑脊髓穿刺针从枕骨大孔垂直刺入，再向前刺入颅腔，左右搅动捣毁脑组织；然后将针退至皮下，再将针尖向后刺入脊髓管捣毁脊髓。若蟾蜍四肢肌肉松软，呼吸消失表示脊髓已破坏完全。否则，按上述方法再行破坏。
图1 破坏蟾蜍脑脊髓的图示
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图2 剪除躯干上部及内脏
（三)剥皮 注意保护脊柱两侧的坐骨神经束。用左手持大镊子夹住脊柱的断端(不要握夹住坐骨神经)。右手捏住背面皮肤边缘，向下剥掉全部后肢的皮肤(图3)。将标本放入盛有任氏液的烧杯中。
图3 剥www.lindalemus.com掉后肢皮肤
（四)将手及用过的剪刀、镊子等全部手术器械洗净，再进行下述步骤。
(五)分离两腿 将已剥皮的下肢标本放在蛙盘上， 用粗剪刀将腹侧耻骨联合及背侧骶骨突起的部位剪平，沿正中线将两侧大腿分离(注意不可剪歪。以防损伤坐骨神经)。
(六)制作坐骨神经腓肠肌标本 取一只腿腹侧向上固定于蛙盘上。
1.游离坐骨神经 用玻璃针沿脊柱侧将坐骨神经根游离。将标本背侧向上固定。用玻璃针在大腿背侧循坐骨神经沟(股二头肌和半膜肌之间的裂隙中)找到坐骨神经后分离清楚，用玻璃针在大腿根部沿神经的走行穿至腹侧，在确认玻璃针上面无坐骨神经后，用小剪刀将玻璃针上面的肌肉及结缔组织剪断暴露出整根坐骨神经。 再用粗剪刀在坐骨神经根部保留神经发出部的约1厘米脊柱剪去其余部分，将坐骨神经游离。用大镊子提起坐骨神经所连的脊柱块，用小剪刀剪药品数据断坐骨神经上的小分支将神经干游离至腘窝。
2.完成坐骨神经-腓肠肌标本 分离腓肠肌跟踺，用线结扎，并在结扎线的远侧剪断跟腱将腓肠肌游离至腘窝处。将游离干净的坐骨神经搭在腓肠肌上。在膝关节周围剪掉全部大腿肌肉并用粗剪刀将股骨下端刮干净。在膝关节以上1厘米处剪断股骨。再在膝下剪去胫骨。此时即完成坐骨神经-腓肠肌标本的制作。用浸有任氏液的锌铜弓迅速接触坐骨神经，如腓肠肌有快速收缩，表明标本兴奋性良好。 将制备好的标本放入盛有任氏液的烧杯中，待其兴奋性稳定后再进行实验。
注意事项
1.尽量用器械操作，忌用金属器械触、夹神经。
2.操作过程中防止过度牵拉神经。
3.用任氏液保持神经湿润。
