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1.3 用MTT 法测定用 MTT 法测定地塞米松不同浓度条件下，腭胚突间充质细胞的光吸收值（OD 值)MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。光吸收值（OD 值)，可间接反映活细胞数量，不同生长条件下OD 值可以反应该条件下细胞的生长活性。原代培养的EPM 细胞，计数后以5×104 个细胞/孔接种到96 孔板。培养72h 后，吸去原培养基，试验组四个，分别加入浓度为1×10－6mol/l，1×10－7mol/l，1×10－8mol/l，1×10－9mol/l 地塞米松的培养基，每个浓度设置三个复孔。对照组，三个复孔，继续添加不含地塞米松的原培养基，将96 孔板放入孵箱中继续培养，从第1 天开始应用MTT 法检测各组细胞OD 值，连续检测5 天。将每天各组OD 值取平均数后，绘制曲线以及计算各组抑制率（抑制率=1-加药组OD 值/对照组OD值)。上述步骤重复3 次，将检测得到的各浓度组不同培养时间的OD 值分别计算均数，采用SPSS 软件，进行统计分析。医.学.全.在.线网站提供。
1.4 不同浓度地塞米松对腭胚突间充质细胞凋亡的检测原代培养的 EPM 细胞，计数后以5×104 个细胞/孔接种到6 孔板。培养72h 后，吸去原培养基，试验组四个孔，分别加入浓度为1×10－6mol/l，1×10－7mol/l，1×10－8mol/l，1×10－9mol/l 地塞米松的培养基1500ul。对照组，两个孔，继续添加不含地塞米松的原培养基1500ul。
继续培养72 小时，吸取原培养基，用PBS 快速洗细胞爬片两遍后，4%中性多聚甲醛常温固定15～20min。CMF-PBS 液室温下振荡洗3 次（5min/次)。每孔滴加碘化丙啶（PI)4~5 滴。
2 结果
2.1 小鼠胚胎腭突间充质细胞形态学观察以及生物学特性鉴定采用酶消化法获得的原代细胞，最初接种的细胞在显微镜下为折光性强的小圆形，悬浮状态。20 min 后开始贴壁，24 h 后， 绝大部分细胞贴壁，倒置相差显微镜下可见，圆形细胞胞质逐渐展开，折光性减弱，完全铺展后细胞为细长梭形或星形，有2～4 个突起，胞浆透明，胞核大，呈圆形或椭圆形，有1～4 个核仁。HE 染色可见EPM 细胞核成蓝紫色，胞浆成红色，细胞成长梭形或星形，核仁大且明显。EPM 细胞免疫组织化学染色显示Vimentin胞浆黄染，表达较强，核蓝色；胞浆内未见CK 阳性表达。
2.1 地塞米松对腭胚突间充质细胞增殖的剂量－效应关系随着 Dex 浓度的降低，EPM 细胞OD 值增高。第1 天各浓度梯度与对照组相比均有统计学意义；第2、3、4 天前三个浓度有统计学意义；第5 天只有前两组与对照组有统计学意义。而所有5 天Dex 浓度为1×10－6mol/l 组的P 值大多<0.01。
2.2 不同浓度地塞米松对腭胚突间充质细胞增殖的时间－效应关系地塞米松作用后第1、2 天，增殖尚不活跃，各加药组间无明显的差异（P>0.05)。从第3 天开始，各浓度组与对照组间OD 值明显拉开距离，第4、5 天，各组的变化都趋于稳定。随着时间的延长，各浓度组生长的曲线基本呈现S形，与对照组相仿，但地塞米松组细胞的增殖活跃程度明显低于对照组。
