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乙肝大三阳患者317例HBV DNA定量检测结果分析
【关键词】 PCR HBV DNA 定量 大三阳 拷贝/ml
聚合酶链反应(PCR)测定现已用于，如病毒性肝炎治疗的动态观察。本文通过对我科317例乙肝五项大三阳患者HBV DNA定量检测中3例病毒量<103拷贝/ml的样本进行纠正，分析PCR定量检测拷贝数明显偏低的原因，报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选择我科2007年3月至2008年2月乙肝五项为大三阳的患者371例进行HBV DNA定量检测。
1.2 方法 检测使用SLAN荧光定量扩增仪，复星乙型肝炎病毒(HBV)核酸扩增(PCR)荧光定量检测试剂盒。该试剂盒对HBV的检测灵敏度为103拷贝/ml, 检测范围为103～108拷贝/ml。由专业技术人员严格按操作规程进行检测。 1.3 判断HBV复制的标准 HbeAg阳性和HBV DNA拷贝定量检测病毒含量＞105/ml［1］。这说明病毒复制能力强，有较高的传染性医学全.在线www.lindalemus.com。
1.4 统计学分析 计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 317例HBV DNA定量检测结果 全部病例中，314例 (99.05%) HBV DNA定量检测病毒含量＞105拷贝/ml,仅3例 (0.95%)HBV DNA定量检测病毒含量＜103拷贝/ml，差异有统计学意义(P＜0.05)。
2.2 将HBV DNA定量检测病毒含量＜103拷贝/ml的3例患者标本调整后再次检测结果 将此3例标本放置4 d后稀释10倍重新检测，2例再次检测病毒含量分别为3.74×106拷贝/ml和7.13×105拷贝/ml。而另1例再次检测结果同前，经分析考虑可能为病毒变异，更换科华公司的HBV DNA定量检测试剂盒后检测，其病毒含量为2.63×105拷贝/ml。
3 讨论
HBV DNA定量检测灵敏度高、特异性强，可反映病毒在体内活动能力，对指导临床治疗及判断预后具有重要意义。但由于PCR是对原始待测模板核酸的一个扩增过程，任何干扰PCR指数扩增的因素如扩增仪空间温度有差异、临床标本中Taq酶抑制剂的存在都会影响扩增产物的量，不能对原始模板准确定量，使得PCR扩增终产物的数量与原始模板数量之间没有一个固定的比例关系。通过检测扩增产物很难对原始模板进行准确定量［2］。因此，如何消除各种影响PCR准确定量的因素，成为PCR检测价值的关键。
