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1 材料与方法
1.1 实验动物 健康雄性Wistar大鼠14只，平均体重(25±20)g，购自郑州大学实验动物中心。自由饮水、进食，室温25.2 ℃，分笼饲养。
1.2 动物模型的制备 大鼠于术前12 h禁食，自由饮水。采用文献方法制作大鼠肢体缺血再灌注模型，沿大鼠双后肢根部用止血带结扎，完全阻断血流;阻断4 h后松解止血带，恢复双后肢血流。自大鼠腹主动脉放血处死动物，血液用做检测血液流变学指标及血浆P选择素和细胞间粘附分子1(intracellular adhension molecule1, ICAM1)浓度。
1.3 动物分组 实验大鼠14只，随机分为2组，阿加曲班组和对照组，每组7只。阿加曲班组缺血4 h，于再灌注前30 min给予阿加曲班5 mg/kg 腹腔注射。对照组大鼠单纯肢体缺血4 h后再灌注，再灌注前30 min给予等量0.9%氯化钠溶液，腹腔内注射。2组动物均于再灌注2 h后采血观察指标。
1.4 血液流变学指标测定 应用SA6000全自动血流变检测仪测定血浆粘度(ηp)、全血低切还原粘度(Lηre,1/s)、全血高切还原粘度(Hηre, 200/s)、红细胞比容(Hct)、红细胞聚集指数(EAI)、血沉方程K值(ESRK)、红细胞刚性指数(TK)、红细胞变形指数(EDI)。
1.5 ELISA法测定血浆P选择素、ICAM1浓度 血标本均置于含抗凝剂EDTA的试管中，3 000 r/min离心15 min，-70℃冰箱内保存。样本统一测定，严格按照试剂盒说明操作。ELISA试剂盒购自天津灏洋生物制品公司。
1.6 统计学分析 应用SPSS 13.0统计软件，计量资料以±s表示，采用t检验，P<0.05为差异无统计学意义。
2 结果
2.1 2组血液流变学指标比较 阿加曲班组ηp、Hηre、Lηre、EAI和TK显著低于对照组(P<0.05)，EDI高于对照组(P<0.05)，2组Hct和ESRK差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。表3 2组血液流变学指标比较注：与对照组比较，^P<0.05
2.2 2组血浆P选择素浓度和ICAM1浓度比较 阿加曲班组血浆P选择素和ICAM1浓度低于对照组(P<0.05)。见表4。表4 2组血浆P选择素浓度和ICAM1浓度比较注：与对照组比较,^P<0.01
3 讨论
缺血再灌注损伤的发生机制错综复杂，活性氧代谢产物、钙超载、微循环障碍、血液流变性改变和凝血酶的激活等是导致该损伤的主要机制[5] 。在缺血再灌注时，机体的凝血活性增强主要是由于内皮细胞的直接损伤和各种细胞因子促进内皮细胞表达各种粘附分子，例如E选择素、P选择素和ICAM1[6];内皮损伤使内皮下的组织因子入血，另一方面，单核细胞和内皮细胞生成组织因子增加[7]。粘附分子和组织因子分别从内源性途径和外源性途径激活了凝血系统，其后果是使纤维蛋白原转变为纤维蛋白，甚至导致微循环中广泛的微血栓形成医.学全.在.线网站www.lindalemus.com。
微血栓的形成会增加血粘度，堵塞微血管，进一步加重微循环障碍和血液流变性异常。更重要的是，凝血过程会通过多种炎症发展，比如活化因子Ⅹ(FⅩa)可以诱导内皮细胞表达细胞因子和粘附分子[8]。更能把凝血过程和炎症过程紧密地联系在一起的是凝血酶(因子Ⅱa)，体外试验显示它能诱导单核细胞和中性粒细胞趋化[9]，诱导内皮细胞表达粘附分子，诱导中性粒细胞粘附[10]。凝血酶还能强力激活血小板，并促进血小板介导的中性粒细胞和内皮细胞之间的粘附[11]。体内体外试验均表明，FⅩa和凝血酶还能促进中性粒细胞和内皮细胞等细胞表达细胞因子[12]。
微循环障碍、血液流变性改变和凝血系统的激活，三者互为因果，相互影响，从而形成恶性循环，导致微循环缺血、瘀血、无复流，直接影响组织、器官的血液灌注和代谢，加重缺血再灌注损伤。
阿加曲班是化学合成的低分子药物,直接与凝血酶的催化活性位点结合,灭活凝血酶。由于阿加曲班分子量小,它能进入到血栓内部,直接灭活已经与纤维蛋白结合的凝血酶。其作用特点为: (1)直接灭活凝血酶(因子Ⅱa)的活性[13],其作用不依赖于抗凝血酶; (2)不但灭活液相凝血酶,还能够灭活与纤维蛋白血栓结合了的凝血酶; (3)阻断凝血瀑布的正反馈,间接抑制凝血酶的产生; (4)治疗剂量下对血小板功能无影响,不导致血小板减少症;(5)具有良好的剂量-反应关系,效果和安全性可以预测;(6)与活化部分凝血活酶时间(APTT)或者活化凝血时间(ACT)相关性良好。阿加曲班可通过抑制凝血酶催化或介导的反应并且激活天然的抗凝剂蛋白C从而发挥其药理学作用[14]。阿加曲班在体外就能降低血粘度，并且呈现S曲线，有剂量依赖效应[15]。
