Key words: Sodiumorthovanadate; Chickpea; Diabetes mellitus; Rat, Wistar 糖尿病(diabetes mellitus, DM)的治疗包括饮食控制、注射胰岛素和口服降糖药等,但均不能有效防止并发症的发生[1],因此研究新的糖尿病防治策略具有重要的临床意义[2]。
从钒发现至今的100多年研究中,最受关注的是它的抗糖尿病作用,但该作用需要较高的剂量,会引起多系统毒副反应[3]。为了发挥钒化合物的降糖生化潜能、降低其毒性,研究者们尝试钒与不同配体形成有机钒化合物的疗效,发现其联合作用明显好于钒及配体的单独使用[4]。中药和植物降糖保健治疗作用也一直受到临床的关注[5],如维药记载的鹰嘴豆即是其中的一种。本实验用天山鹰嘴豆联合低剂量原钒酸钠治疗糖尿病模型大鼠,对它们单独和联合使用的疗效进行比较,以观察钒和鹰嘴豆联合应用的效果。
1 材料与方法
1.1 饲料的准备 精选新疆天山鹰嘴豆,室温干燥保存。鹰嘴豆芽的培植参照Burguillo等的方法[6],于室温(25~27)℃、相对湿度70%,陶器内避光培育5?d而成,60?℃恒温烤箱内过夜烘干,研磨成粉。未经培育的鹰嘴豆直接研磨成粉。豆粉和豆芽粉分别按5%的比例与基础饲料混合加工成干预饲料(即每100?g饲料中含5?g豆粉或豆芽粉和95?g?基础饲料)[7]。
1.2 实验动物 雄性Wistar大白鼠,58只,体重155~190?g。实验过程中大鼠的饲养环境稳定,保持室温在(25±2)℃,相对湿度(55±5)%,灯光控制12?h?昼夜交替,基础饲料(由山东米歇尔生物制品有限公司提供,中国 泰安)饲喂1周后进行分组。
1.3 实验分组 空腹24?h后,大鼠按简单随机法分为正常对照组(C)8只和糖尿病组50只,糖尿病组大鼠接受一次性尾静脉注射链脲佐菌素(45?mg/kg,溶解于新鲜配制的0.1?mmol/L枸橼酸缓冲液,pH4.5)成模,正常对照组注射相同容量的0.1?mmol/L枸橼酸缓冲液。10?d?以后剪尾(1?mm)取血用血糖仪(罗氏二代血糖仪,强生牌血糖试纸)测试大鼠非空腹血糖,血糖超过15?mmol/L为糖尿病成模大鼠,共48只,随后被随机分为以下6组:糖尿病对照组(D)、糖尿病原钒酸钠治疗组(D+V)、糖尿病鹰嘴豆治疗组(D+P)、糖尿病鹰嘴豆芽治疗组(D+Ps)、糖尿病鹰嘴豆和低剂量原钒酸钠治疗组(D+P+V)、糖尿病鹰嘴豆芽和低剂量原钒酸钠治疗组(D+Ps+V)医.学全.在.线网站www.lindalemus.com。
1.4 糖尿病模型大鼠的干预和处理 D组大鼠不予任何治疗干预,饲喂基础饲料和自来水;(D+V)组大鼠给以原钒酸钠(为减少不良反应先从低剂量0.2?mg/mL开始,隔日增至0.4?mg/mL,1周后为0.5?mg/mL)饮水治疗,为降低钒的毒性作用,将原钒酸钠溶于含0.5%NaCl的水中饮用,饲喂基础饲料;(D+P)组饲喂5%鹰嘴豆饲料和自来水;(D+Ps)组饲喂5%鹰嘴豆芽饲料和自来水;(D+P+V)组饲喂5%鹰嘴豆饲料和低剂量原钒酸钠(溶于含0.5%NaCl的自来水)水溶液(0.2?mg/mL);(D+Ps+V)组饲喂5%鹰嘴豆芽饲料和低剂量原钒酸钠水溶液(0.2?mg/mL)。每周1次于相同时间测量动物血糖和体重。上述治疗持续4周时,对大鼠行股动脉插管,留取空腹血备查血糖、血脂、血浆胰岛素、肝功和肾功,然后进行口服葡萄糖耐量试验,管喂2?g/kg葡萄糖后,分别于30、60、90和120?min测量血糖值。
1.5 统计学处理 用SPSS11.0软件,所有数据以±s表示,对数据进行单因素方差分析(ANOVA),P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 鹰嘴豆芽和原钒酸钠对糖尿病大鼠体重、血糖的影响 见表1。与C组相比,D组大鼠的体重随病程进展明显下降(P<0.05),而各糖尿病治疗组中除(D+P)组,其他各组大鼠体重均随治疗进程逐渐增加,其中,(D+Ps)组、(D+P+V)组和(D+Ps+V)组均明显高于D组和(D+P)组(P<0.05);而(D+V)组体重,增加不明显。
D组血糖是C组的4倍。D组血糖随病程进展持续增加;各治疗组血糖随治疗不同程度下降,从第2周开始均明显低于D组;其中(D+P)组和(D+Ps)组的血糖在治疗的第1、2周开始下降却并不理想,仍明显高于C组和其他3个治疗组;(D+P+V)组和(D+Ps+V)组血糖控制效果较理想,已达到(D+V)组水平,且与C组之间无统计学差异,自治疗后第1周血糖开始下降,一直持续到治疗后4周。