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肠易激综合征(irritable bowel syndrome，IBS)是临床上最常见的一种胃肠道功能紊乱性疾病，发病率高，治疗困难[1]。目前尚无一种药物对所有IBS均有肯定疗效。有研究发现，肠道菌群的变化可能与IBS症状产生和持续存在有关，益生菌治疗IBS的疗效也在不断的观察中。本研究旨在观察补充一定益生菌后，IBS患者肠道相关菌群的变化情况。
1 对象和方法
1.1 对象选择 选择2007年9月—2008年9月于新华医院消化内科门诊就诊的IBS患者60例。诊断符合罗马Ⅲ标准[2]，经体格检查，血、尿、粪常规，血生化及B超，电子结肠镜等检查，排除器质性疾病。排除标准：怀孕期或哺乳期患者，有肠道器质性疾病或其他系统严重疾病者，有腹部手术史者或其他无法充分合作者;且患者近2个月未使用过抗生素及相关益生菌制剂。同时根据年龄、性别比例，选取正常对照人群20人。一般资料见表1。
1.2 方法 将所有IBS患者随机分为2组，治疗组予以培菲康治疗4周，2片，3次/d;对照组予以安慰剂治疗4周。IBS患者分别于治疗开始前及结束时，各收集粪便样品1次。正常对照人群收集粪便样品1次。
粪便样品收集后立即厌氧保存于-70℃冰箱内。粪便样本DNA提取运用QIA amp DNA Stool Kit(Qiagen,Hilden,Germany)，提取后的粪便DNA样品于-20℃冰箱内保存。所得DNA样品通过荧光定量PCR检测，与相应外标准品比对，检测其相应细菌DNA的拷贝数。表1 研究对象一般资料
1.3 疗效观察 参照IBS医疗调查表设计有关胃肠道症状量表，治疗前后由专科医师进行症状评估及评分。
1.4 细菌DNA测定 参照Malinen等[3]报道，依据双歧杆菌及乳杆菌16SrDNA基因序列设计属特异性PCR扩增引物对，并在BLAST基因库内比对引物序列特异性，上下游序列见表2。引物对由宝生物工程(大连)有限公司设计，上海生工生物工程技术服务有限公司合成。荧光定量PCR试剂SYBR Premix Ex Taq购买自宝生物工程(大连)有限公司，实验在LightCycle(罗氏公司)上完成，每个样品均有空白对照。表2 双歧杆菌和乳杆菌属特异性引物
1.5 统计学处理 采用SPSS 11.0统计软件。由于粪便内双歧杆菌及乳杆菌绝对值不呈正态分布，故取其对数值(log10)进行统计分析。计量资料以±s表示，组间均值采用方差分析(analysis of variance),P<0.05差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 治疗前IBS患者与正常人群粪便中双歧杆菌及乳杆菌数量分析 见表3。培菲康治疗前,腹泻型IBS患者粪便中双歧杆菌及乳杆菌含量均少于正常人群(P<0.01);混合型IBS患者粪便中双歧杆菌含量少于正常人群(P<0.01)，乳杆菌含量与正常人无统计学差异(P>0.05);便秘型IBS患者及未分型IBS患者粪便中双歧杆菌和乳杆菌含量与正常人群无统计学差异(P>0.05)医.学全.在.线网站www.lindalemus.com。
2.2 治疗前后IBS患者粪便中双歧杆菌及乳杆菌数量分析 见表4、5。由于混合型IBS患者及未分型IBS患者病例数较少，该部分实验仅包括腹泻型IBS患者及便秘型IBS患者。IBS患者治疗后，粪便中双歧杆菌及乳杆菌含量均高于治疗前(P<0.01)，而安慰剂组治疗后患者粪便中双歧杆菌及乳杆菌含量与治疗前无明显差异(P>0.05)。表3 治疗前IBS患者与正常人群粪便中双歧杆菌及乳杆菌数量与正常组比较：
