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1 材料和方法
1.1 药品与试剂
牛膝由泰山医学院药学院购进，经本院生药学教研室鉴定为怀牛膝;联苯双酯滴丸，德州德药制药公司，批号061005 ;无水乙醇，分析纯，天津市广成化学试剂有限公司，批号为080215;0.9%氯化钠注射液(normal NS)，山东省泰安制药厂，批号07033102;GPT、SOD、MDA试剂盒，南京建成生物工程研究所;卡介苗，上海生物制品研究所;脂多糖，Sigma公司产品。
1.2 仪器
BT815A自动生化测试分析系统，上海三科仪器有限公司;电子分析天平AR2140，奥豪斯(上海)公司;LXJIIB型低速大容量离心机，上海安亨科学仪器厂。
1.3 动物
昆明种小鼠，18～22 g，雌雄兼用，由泰山医学院动物实验中心提供。
1.4 方法
1.4.1 牛膝多糖的提取纯化和含量测定[2] 取粉碎至适当颗粒的牛膝药材40 g，置1000 ml容量瓶中加80%乙醇200 ml浸泡14 h，微沸回流脱脂2次，每次2 h。残渣滤干置1000 ml圆底烧瓶中按料液比1︰15加水600 ml，80℃，提取两次，每次3 h。合并两次提取的滤液，置旋转蒸发仪上浓缩至约100 ml。Savage试剂法脱蛋白，加入3倍的Savage试剂充分震荡混匀，5000 r/min离心15 min，取上清液重复脱蛋白操作2次，至不再出现蛋白。将所得溶液按1︰5加入无水乙醇进行醇沉，静置一夜，5000 r/min离心15 min，所得粉末用CCl4洗涤2次，乙醚洗涤2次，每次洗涤后离心。干燥的白色粉末即为牛膝多糖，用苯酚—硫酸法测定所提取牛膝多糖含量为74.28%医.学全.在.线网站www.lindalemus.com。
1.4.2 动物分组与给药 取小鼠60只，雌雄各半，按性别和体重随机分为5组。①生理盐水对照组;②模型对照组;③联苯双酯150 mg·kg-1·d-1阳性对照组;④⑤分别为牛膝多糖150 mg·kg-1·d-1、300 mg·kg-1·d-1实验组。③组灌胃联苯双酯150 mg·kg-1·d-1，④⑤组分别灌胃牛膝多糖150 mg·kg-1·d-1、300 mg·kg-1·d-1，①②组分别灌胃等容量生理盐水，连续给药10天。参照文献[3]，制作小鼠免疫性肝损伤模型，即由尾静脉注射0.2 ml内含2.0 mg BCG的生理盐水溶液，10 d后每鼠尾静脉注射7.5 μg LPS。12 h后小鼠摘眼球取血，4000 r/min离心15 min分离血清，测定血清中ALT的含量。上述取血后处死小鼠剖取出肝脏、胸腺、脾脏。肝脏置生理盐水中洗净血液，拭干称取0.5 g用冷生理盐水制成10%肝匀浆，3500 r/min离心10 min，取上清测定ALT、 MDA、SOD的含量。胸腺、脾脏称其质量，计算脏器指数[脏器指数=脏器重(mg)/体重(g)]。
