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癫痫是由多种病因所致的发作性疾病，其发病机制复杂，很多机制至今不明。而对于人类来说，人脑的特殊性使人类癫痫的研究还存在很大困难。因此，建立能模拟人类癫痫发作的实验动物模型对于癫痫研究至关重要。近年来，本研究室发现槐定碱(SRI)可导致大鼠出现痫样放电[1]，因此利用槐定碱建立了一种全身性发作的癫痫动物模型，在本研究中，我们通过观察槐定碱(最佳剂量为47.83mg/kg)引起大鼠癫痫发作的行为表现、癫痫发作的潜伏期、发作程度、发作持续时间及海马神经元超微结构的变化，进一步评价槐定碱点燃癫痫模型的效应，从而探讨癫痫的发病机制。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂： 日立H-600电镜(日本日立公司);BMJ-Ⅲ型组织包埋机(常州市郊区中威电子仪器厂);PHY-Ⅲ病理组织漂烘仪(常州市郊区中威电子仪器厂);78HW-1 型恒温磁力搅拌器(杭州仪表电机有限公司);槐定碱(宁夏盐池药厂，批号为021180);苯巴比妥钠(上海新亚药业有限公司，批号为040603);多聚甲醛(北京益利精细化学品有限公司，分析纯，批号为20020203)。
1.2 实验动物及分组：健康成年Sprague-Dewley(SD)大鼠(雌雄不拘)30只，体重180-220g(由宁夏医科大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK(宁)2005-001，随机分为生理盐水对照组(NS)、槐定碱致痫组(SRI)，苯巴比妥钠﹢槐定碱组(PBS+SRI)，每组各10只。
1.3 动物模型制备及大鼠惊厥分级：槐定碱致痫组大鼠腹腔注射槐定碱(47.83mg/kg)，而生理盐水对照组大鼠腹腔注射相同容量的生理盐水，苯巴比妥钠﹢槐定碱组预先腹腔注射苯巴比妥钠20mg/kg,0.5 h后按上述剂量(47.83mg/kg)腹腔注射槐定碱，观察大鼠行为表现，连续观察2h(超过此时间，癫痫一般不再发作)。观察指标：①潜伏期：从腹腔注射SRI到大鼠首次出现痫性发作的时间为潜伏期;②发作持续时间：大鼠痫性发作达Ⅳ级及以上后所持续的时间;③发作程度。按照Racine分级标准[2]，将动物痫性发作的表现分为0级：无任何反应;Ⅰ级：面部抽搐及咀嚼;Ⅱ级：点头和(或)甩头;Ⅲ级：前肢阵挛;Ⅳ级：前肢阵挛伴伸直;Ⅴ级：前肢及全身阵挛，失去平衡，跌倒。Ⅲ级及以下为轻型发作，Ⅳ级及以上为重型发作。Ⅳ级以下判定为无效，表现为轻型发作[2]。
1.4 电镜观察：以上各组大鼠于相应时间点经腹腔注射20% 乌拉坦(0.5g/kg)麻醉后迅速开胸暴露心脏，沿左心室向升主动脉插管并固定，右心耳剪一小口，先快速灌入生理盐水300ml充分冲洗血液，然后换4%多聚甲醛戊二醛混合溶液500ml约1h 进行组织固定，见四肢、尾阵挛直至僵直表明灌注良好。断头取脑，切取海马CA1区和CA3区部位3mm×3mm×3mm的脑组织，将其放入0.1mol二甲砷酸钠缓冲液中冲洗后保存在2%-2.5%的戊二醛固定液中2h。再换为0.1mol二甲砷酸钠缓冲液漂洗3次，每次间隔2h，过夜保存在4℃冰箱，用于电镜观察。
