2 结果
2.1 行为学表现:生理盐水对照组大鼠活动正常,无癫痫样发作行为表现。槐定碱致痫组大鼠腹腔注射槐定碱后,大鼠由活动状态逐渐变得安静,随后出现呆滞,部分动物出现呼吸急促,经(8.46±1.62)min的潜伏期后,大鼠逐渐出现癫痫样发作表现。开始出现须动、点头、咀嚼样动作,尾巴翘起,湿狗样抖动, 伴流涎,呈阵发性,至0.5h左右开始有面肌抽动、双前肢抬起阵挛或单肢抽搐,随后出现姿势失衡,跌倒,阵挛抽搐,继之发生全身强直,大鼠口吐白沫,嘴唇、四肢皮肤发绀,甚至尿失禁,持续(36.84±5.69)min,反复发作,抽搐缓解后,大鼠可自由活动,2h 后大部分动物停止发作,点燃率达100%(10/10),达到Ⅳ级以上发作的成功率为80%(8/10),2只死亡,死亡率为20%。经苯巴比妥钠干预后,槐定碱致痫大鼠主要为0级和Ⅰ级痫性发作表现,癫痫样发作潜伏期延长至(35.83±6.65) min(P<0.05),如表1、2所见。表1 槐定碱对大鼠痫样发作潜伏期表2 槐定碱对大鼠癫痫发作程度的影响医.学全.在.线网站www.lindalemus.com
2.2 电镜观察
2.2.1 生理盐水对照组:大鼠海马CA1区和CA3区神经细胞核膜、核仁结构清晰,胞核内染色质分布均匀,细胞质内细胞器丰富,可见完整的线粒体、高尔基体和粗面内质网;突触结构正常,突触间隙清楚;毛细血管的内皮细胞核呈长椭圆形,核膜结构清晰,染色质均匀,见图1-2(目录后)。
2.2.2 槐定碱致痫组:槐定碱致痫后大鼠海马CA1区和CA3区神经细胞核严重固缩,核膜内陷,粗面内质网扩张,有大量的突触,突触间隙模糊,可见毛细血管数量多,部分毛细血管的内皮细胞核固缩,毛细血管壁增厚,见图3-4(目录后)。
2.2.3 苯巴比妥钠+槐定碱组:大鼠海马CA1区和CA3区神经细胞核膜双层结构较清楚。大多数细胞结构正常,少部分细胞有灶性细胞核固缩,见图5(目录后)。
3 讨论
3.1 槐定碱致痫大鼠模型的建立:SRI是从豆科槐属植物苦豆子中分离提纯出来的一种生物碱,动物实验研究表明,SRI能够显著拮抗戊巴比妥钠引起的催眠作用,具有明显的中枢兴奋作用[3]。在本实验中,我们观察了槐定碱引起大鼠癫痫发作的行为表现及癫痫发作的潜伏期、发作程度、发作持续时间。实验结果显示:槐定碱组大鼠经(8.46±1.62)min的潜伏期后出现癫痫样发作,可出现凝视、湿狗样抖动、阵发性头面部肌肉抽搐,如眨眼、咀嚼、流涎,类似人类癫痫的自动症,继之前肢阵挛、后肢站立,并出现全面强直阵挛发作,最终出现癫痫持续状态。从发作表现来讲,类似于人类的复杂部分性发作,之后继发为全面性发作,即发作由I、II、III级(Racine分级,部分性发作)向IV、V级(Racine分级,全身性发作)发展,其中 I级和II级之间会有交叉,III级和IV级之间也有交叉。点燃率达100%,死亡率为20%。经传统的抗癫痫药苯巴比妥钠干预后,槐定碱致痫大鼠仅表现为0级和Ⅰ级痫性发作,且发作潜伏期延长。提示槐定碱致癫痫模型是一简便、稳定、与人类癫痫相似的急性癫痫模型,此模型在行为学上具有以下优点:① 制作简便、成本低、致痫潜伏期短,致痫率高,死亡率低。② 致痫过程清晰,痫性发作的分级容易确认,并在解除痫性发作后状态良好。