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1.2 方法 标本离体后分成肾癌组织组、癌旁组织组、正常肾组织组，每组8例，均用10%的甲醛固定48 h，石蜡包埋5 μm切片，同时应用免疫组织化学(immunohistochemistry)方法观察细胞增殖标记物增殖细胞核抗原(PCNA)的表达变化，探讨PCNA的表达与肾癌的关系。所有标本均在Motic Med 6.0数码医学图像分析系统内在相同的放大倍数(400)下，每个组计数30个视野中的总细胞数和阳性细胞数，计算增殖细胞的百分比，作为增殖指数(proliferation indx，PI)。
1.3 肿瘤分期标准 Ⅰ期:肿瘤局限在肾包膜内。Ⅱ期:肿瘤穿破肾包膜侵犯肾周围脂肪组织，但局限在肾周围筋膜以内。Ⅲ期:肿瘤侵及区域淋巴结，或(和)肾静脉、腔静脉。Ⅳ期:肿瘤侵犯附近器官或远处转移。
1.4 统计学分析 计量资料以±s表示，采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
PCNA免疫组化染色: 正常肾组织内的细胞核有弱阳性表达，细胞核内有弱棕黄色颗粒颜色，癌旁阳性表达轻度增加，细胞核内的棕黄色颗粒颜色高于正常肾组织，肾癌组织阳性表达明显增多，细胞核内棕黄色颗粒颜色明显加深, 明显高于癌旁组织(图1～3)，正常肾组织组与肾癌组、癌旁组，差异均有统计学意义(P<0.01)。见表1。肾癌4个期之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。 表1 PCNA在肾癌组织、癌旁组织和正常肾组织表达比较注：与对照组比较，^P<0.01
3 讨论
PCNA是DNA聚合酶δ的辅助蛋白，其合成明显与细胞周期有关：静止期细胞内含量很少，G1晚期开始大幅度增加，S期达到高峰，G2M期明显下降，其量的变化与DNA合成一致[3]。PCNA是反应细胞增殖分数和所处周期的客观指标[4]。目前也是肾癌标记物热点研究之一[5]医.学全.在.线网站www.lindalemus.com。
肾癌细胞的生物学行为与癌细胞的增殖活性密切相关，PCNA是一种仅在增殖状态细胞内出现的非组蛋白型核蛋白。PCNA的表达越高说明DNA复制活跃程度增加，它是反映细胞增生的一项重要指标。我们的实验显示：PCNA在正常肾组织、癌旁组织和肾癌组织中阳性表达不同，3组两两比较差异有统计学意义，说明PCNA在肾透明细胞癌发生过程中起着重要作用，并且可以作为肾透明细胞癌诊断的一种参考指标。另外PCNA的活跃程度也反映了肾透明细胞癌的发生状态。
关于PCNA在肾透明细胞癌不同分期表达差异性的研究，目前还不完全一致，多数认为PCNA表达显著相关于高分期[6]，但少数研究结果认为PCNA表达与分期无相关关系[7]，我们的数据显示PCNA在正常肾组织、癌旁组织及肾癌组织之间差异有统计学意义(P<0.05)，而在肾癌组织4个分期之间差异无统计学意义(P>0.05)。
实验表明，肾癌组织PCNA表达增加，癌旁组织轻度增加，正常肾组织也有一定表达，但明显少于肾癌组织，表明增殖过度可能导致肾癌病变的发生。
【参考文献】
1 王亦兴，朱芳高，王立富.肾癌术前化疗性栓塞疗效评价.河北医药，2008，30：18791880.
2 柯莽，周涛，王天济，等.应用组织片在研究人肾癌中Survivin、EGFR和PCNA的表达与预后的关系.浙江临床医学，2007，9：15901592.
3 陈学军,高剑波,周志刚，等.螺旋CT征象与增殖细胞核抗原表达间关系.医药论坛杂志，2007，28：79.
4 莫蕾，王海林，李勇，等.早期肾癌MSCT灌注成像与VEGF、PCNA表达关系的研究.广州医药,2007，38：1315医.学全.在.线网站www.lindalemus.com.
5 汤中林，李如昌，陈刚，等.CD44v6和PCNA在肾透明细胞癌的表达及其预后价值.现代泌尿外科杂志，2004，9:1214.
6 吴剑平，陈明，孙则禹.肾癌组织中CD40/p53/PCNA表达的研究.广西医学，2008，30：12981299.
7 Haitel A, Wiener HG, Migschitz B,et al. Proliferating cell nuclearantigen and MIB21. An alternative to classic prognostic indicators in renalcell carcinomas. Am J Clin Pathol,1997,107:229235.
