据统计,约有80%以上的肿瘤病人死于肿瘤的侵袭与转移,其过程虽很复杂,但其基本步骤包括压力作用、癌组织粘附性降低、癌细胞迁移、细胞粘附分子作用和细胞外基质降解。基质金属蛋白酶(MMP能有效降解细胞外基质,在肿瘤生长、转移过程中均起着重要作用。MMP_7是MMP家族中最小的成员,可降解各种细胞外基质成分。为研究胃癌发生浸润、转移的分子机制,本研究应用免疫组化检测胃癌组织中MMP_7和其组织抑制因子_1(TIMP_1的表达,探讨其在胃癌发生、发展中的作用。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2004_01—2006_12汕头大学医学院第一附属医院有完整资料的原发性胃癌手术切除标本的存档蜡块36例(男性32例,女性4例。年龄44~81岁,平均60.2岁。所有患者术前均未接受放、化疗,并进行随访。病理组织分型:标本经病理证实为腺癌,其中低分化腺癌11例,高、中分化腺癌25例。采用国际抗癌联盟1987年公布的胃癌TNM分期:Ⅰ期2例,Ⅱ期8例,Ⅲ期20例,Ⅳ期6例。其中有、无淋巴结转移分别为24和12例。
1.2 检测方法
手术标本常规福尔马林固定,24h内取材,石蜡包埋,连续切片(厚4μm,苏木精_伊红染色。MMP_7和TIMP_1免疫组化染色。本实验采用链霉素_生物素(S_P免疫组化技术,MMP_7和TIMP_1单克隆抗体及免疫组化试剂盒(福州迈新生物技术公司,中国。按说明书操作。用已知的乳腺癌阳性片作阳性对照,同时用PBS替代一抗作阴性对照。根据细胞膜或胞浆的染色程度及染色细胞百分率进行判定:细胞膜或胞浆中有棕黄色颗粒沉着为阳性。基本不着色或着色细胞占计数细胞<5%为“_”,着色淡或着色细胞占5%~25%为“+”,着色深或着色细胞占26%~50%为“++”,着色细胞计数>50%为“+++”医.学全.在.线网站www.lindalemus.com。
1.3 统计学处理
各样本计数资料采用SPSS10.0软件包统计处理,组间计数资料差异比较采用χ2检验。
2 结果
MMP_7在胃癌组织中的阳性表达率(58.3%(21/36显著高于癌旁组织(5.6%(2/36(P<0.01;TIMP_1在胃癌组织中的阳性表达率(44.4%(16/36低于癌旁组织(50.0%(18/36,但无统计学意义(表1。MMP_7在胃癌组织中的表达呈细胞膜分布,阳性信号为棕黄色颗粒(图1,封3,MMP_7在癌旁组织中呈阴性表达,少部分为弱阳性,染色较浅(图2,封3。TIMP_1在胃癌组织及癌旁组织中的表达呈细胞膜分布,阳性信号为棕黄色颗粒(图3、4,封3。MMP_7的阳性表达与胃癌TNM分期(P<0.01及淋巴结转移(P<0.05均显著相关。但与肿瘤大小、部位、脉管侵犯、分化程度、浸润深度等无相关。MMP_7在Ⅰ、Ⅱ期及Ⅲ、Ⅳ期的阳性表达率分别为20.0%和73.1%,分期越晚,表达越强。MMP_7在有、无淋巴结转移的阳性表达率分别为70.8%和33.3%,淋巴结转移越多,表达越强;TIMP_1的阳性表达与胃癌TNM分期显著相关(P<0.05。但与肿瘤大小、部位、脉管侵犯、分化程度、浸润深度、淋巴结转移等无相关。TIMP_1在Ⅰ、Ⅱ期及Ⅲ、Ⅳ期的阳性表达率分别为80.0%和30.8%,分期越早,表达越强(表2。 表1 胃癌及癌旁组织中MMP_7和TIMP_1的表达表2 MMP_7和TIMP_1的表达与相关因素