 |
 |
2.1 模型建造结果
见图1、图2。在大鼠左侧股骨中部做骨缺损并以克氏针做内固定,35天后的实验组取材后缺损区域形成纤维连接,但没有骨性连接。
2.2 大体X线及病理切片
见图3、图4。在图3中我们可以看到骨缺损区域有模糊的软组织影,骨显影不明显,图4则证实了骨缺损区域确实没有形成骨连接。
2.3 BMP2基因的相对表达变化
见表1。在3、7、14、21、28、35天时,外周区和中心区BMP2基因的表达差异具有统计学意义,P<0.05。
在外周区1天没有检测到表达,3天有明显表达,7天表达明显增加接近表达高峰,14天以后表达已经降低,28天至35天时表达数值接近1,即接近正常骨组织的表达。其中,3、28、35天之间表达差异无统计学意义,而其他时段之间表达差异有统计学意义,7天时的表达倍数最高,F=350.503,P<0.05。表1 大鼠骨不连模型愈合过程中BMP2基因的相对表达量
BMP2基因没有检测到表达以“-”表示, 在中心区,1天、3天时都没有检测到BMP2基因表达,7天可以检测到表达,14天表达明显增加并接近表达高峰,21天表达减弱,28天至35天表达在正常值附近。其中,1天和3天之间、7天和35天之间、21天和28天之间表达差异无统计学意义,其他时段之间表达差异有统计学意义,14天时的表达倍数最高,F=217.620, P<0.05。
3 讨 论
临床上,引起骨不连的原因很多,损伤区域的局部因素是引起骨不连的始发和重要因素,这些不利因素影响骨的形成和转化,使成骨细胞难以在缺损处形成新生骨而造成骨不连。针对不同的病因,骨不连的治疗方法也各异。手术植骨仍是治疗骨不连最常用的有效方法,自体骨移植效果较好但来源有限,人工骨因缺乏相关的生长因子而诱导活性不足,现利用组织工程技术将相关生长因子置于骨不连区域为解决这一问题带来了希望,其中最重要的生长因子是BMP[2-3]医.学全.在.线网站www.lindalemus.com。
BMP是有效的骨诱导因子,可以诱导间充质细胞增殖、分化为成骨细胞或软骨细胞,在骨的发生、诱导、修复等方面发挥着关键的作用。Senta等[4]实验发现BMP2具有很强的成骨能力。Eckardt等[5]研究证实rhBMP2可以有效地促进兔子胫骨骨不连的愈合。Hsu等[6]将BMP2基因导入骨髓细胞(bone marrow cells,BMCs)来修复骨缺损动物模型,结果显示BMP2基因转染组的愈合明显好于单纯BMCs组。国内也有研究表明BMP2可以增加成骨细胞数量[7]。
本实验在骨不连修复的不同时段,用RTPCR技术测定骨不连中心区及外周区BMP2基因的表达,发现在骨不连修复的早期,中心区BMP2基因的表达时间及达到高峰时间都要明显滞后于外周区,强度也低于外周区,该结果与Sojo等[8]的研究相符。
