1 材料与方法
1.1 实验动物 SD大鼠40只,雌雄各半,体重150~200 g,由中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供。自由饮水、进食,光照时间每日9 h以上。饲养1周后使用。
1.2 药品与试剂 补肾化浊胶囊(沧州市中心医院制剂室提供,批号:040504),尿素氮(BUN)检测试剂盒(批号:280221),肌酐(Cr)检测试剂盒(批号:320431),总蛋白(TP)检测试剂(批号:281181),白蛋白(ALB)检测试剂(批号:251851),以上生化制剂均由中生北控生物科技股份有限公司提供。硫酸庆大霉素注射液(天津金耀氨基酸有限公司提供,2 ml∶8万U,批号:0403022),目测八联试纸(由广州市花都高尔宝生物技术有限公司提供生产日期:20040325),蒸馏水。
1.3 仪器与设备 全自动生化分析仪(美国泰尔康公司生产TECHNICON RAl000型),离心机,一次性注射器(5 ml、1 ml),灌胃器,手术剪,手术镊子,一次性尖头试管。
1.4 药液配制 补肾化浊胶囊低剂量混悬液(108 g/L)蒸馏水配制,补肾化浊胶囊高剂量混悬液(324 g/L) 蒸馏水配制。
1.5 分组与用药 40只大鼠,随机分为4组,对照组、肾损伤模型组、补肾化浊胶囊高剂量组和补肾化浊胶囊低剂量组,每组10只。补肾化浊胶囊高剂量组和补肾化浊胶囊低剂量组分别灌服混悬液,按1 ml·100 g-1·d-1给药,连续4周。期间从第21天皮下注射GM 100 mg·kg-1·d-1,共8 d。对照组、肾损伤模型组:每天灌服同体积水,连续4周。期间肾损伤模型组从第21天皮下注射GM 100 mg·kg-1·d-1,共8 d。4组均于末次给药2 h后,取尿和血进行测定。
1.6 观察指标 本实验中,尿检采用目测八联试纸半定量法测定蛋白总量、尿糖、酮体、葡萄糖、尿液pH值。大鼠取血均未麻醉,采用眼眶静脉取血3~5 ml,离心后取上层血清在全自动生化分析仪测定BUN(速率法)、Cr(苦味酸法)、TP(双缩脲法)和ALB(溴甲酚绿法)。处死后观察肾脏外观。
1.7 统计学分析 计量资料以±s表示,采用单因素方差分析,组间比较采用q检验,P<0.05为差异有统计学意义医.学全.在.线网站www.lindalemus.com。
2 结果
2.1 补肾化浊胶囊对尿液生化指标的影响 高、低剂量的补肾化浊胶囊能显著降低由GM导致的急性肾损伤大鼠尿中蛋白总量、尿糖及酮体,恢复尿液pH值(P<0.05),与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。表1 4组尿液生化指标比较注:与对照组比较,^P<0.01;与肾损伤模型组比较,#P<0.05,△P<0.01
2.2 补肾化浊胶囊对血清生化指标的影响 高、低剂量的补肾化浊胶囊均能显著降低GM肾损伤模型大鼠BUN、Cr含量(P<0.01),与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。高、低剂量的补肾化浊胶囊显著提高GM肾损伤模型大鼠血清TP、ALB总量(P<0.01),较对照组差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。表2 4组血清生化指标的影响n=10,±s表3 4组血清蛋白比较注:与对照组比较,^P<0.01;与肾损伤模型组比较,#P<0.01
2.3 补肾化浊胶囊对大鼠肾脏器官影响的外观检查 对照组大鼠肾脏大小、形状均正常,表面光滑,暗红色,包膜菲薄无粘连,易于剥离,切面皮质与髓质纹理清楚,肾盂部位黏膜光滑,未见渗出物。模型组则比较肥大出现不同程度的渗出血,皮质与髓质间出现红斑。低剂量组有所改善,而高剂量组几乎看不到上述现象。
3 讨论
Cr、BUN是反映肾脏功能的敏感指标。有资料表明,Cr、BUN水平与机体尿酸含量呈正相关,高尿酸血症可直接导致肾脏器质性损伤并且伴有冠状动脉硬化等糖尿病并发症[2]。本研究表明补肾化浊胶囊能有效减少急性肾损伤大鼠的Cr、BUN水平,从而抑制高尿酸血症的形成,减少尿酸盐对肾脏的损害。