1 材料和方法
1.1 组织来源
例1,60岁男性农民.以额部外伤0.5a,伤愈后出现斑块5mo就诊.患者0.5a前擦伤额部,20d后自愈.伤口愈合后逐渐出现斑块,约5mo后,左耳后出现斑块,继之右耳后亦出现皮损,无明显不适.就诊时额部见9cm×7cm×0.5cm暗红色斑块,大斑块边缘有孤立的丘疹及小斑块;左耳廓后有3cm×1.5cm×0.2cm斑块,中央略萎缩(Fig1),右耳后亦见小的皮损,拟诊:结节病.组织病理见真皮内弥漫的炎性浸润,浸润细胞主要为组织细胞,并见少数浆细胞、中性粒细胞、淋巴细胞及多核巨细胞,未见坏死组织.组织片PAS染色及抗酸染色均为阴性.左耳后及右耳后皮损基本改变与额部皮损类似.免疫组化示95%以上的浸润细胞及全部多核巨细胞胞质内CD68 呈强阳性(Fig1),CD20 及CD3 阳性细胞小于1%.植物凝血素(PHA)及结核菌素(PPD)皮试均阴性,其余各项实验室检查无明显异常.头部X片示骨质无异常.3次组织匀浆细菌培养2次分离出表皮葡萄球菌,普通厌氧培养3次未分离出细菌.根据表皮葡萄球菌药敏试验结果用阿莫仙等未控制病情,后期出现表情淡漠,反应迟钝,剧烈头痛,拒绝入院治疗而死亡,自出现斑块至死亡全程13mo.例2,男性,45岁农民,以右眉弓外伤1a,伤愈后出现斑块6mo就诊.就诊时一般情况好,右眼眶旁、颞部及下颌角见5个类圆形暗红色浸润性斑块,最大斑块约3cm×2cm×0.3cm,界清,表面光滑(Fig1).组织病理、免疫病理与例1相同.PHA(-),DDP(),血沉30mm/h、血常规WBC2.4×109 ?L-1 ,其余各项检查无异常发现.皮损组织匀浆细菌培养分离出头状葡萄球菌,严格厌氧条件下有细菌生长,涂片染色为革兰阳性,其形态、大小不一、染色不均,多为杆菌形态,约0.3μm×1μm,排成链状、分枝状,少数革兰染色强阳性,粗而长,可达10μm(Fig1f),初步确定为一种特殊的放线菌.药敏试验:厌氧菌对灭滴灵不敏感;泰能、林可霉素、头孢西丁、万古霉素敏感.头状葡萄球菌对青霉素及红霉素不敏感,头孢类、其他抗生素及万古霉素均敏感.单用林可霉素8mg,im,3次?d-1 ,5d后1皮损中央出现结痂,治疗3mo后皮损基本消退,5mo后停药观察,至今停药已18mo,患者一般情况良好,未见复发.
图1 a:额、颞及左耳后斑块;b:组织病理,真皮网状层密集的炎性浸润,主要为组织细胞,多核巨细胞较常见;c:皮损免疫组化示多数浸润细胞、多核巨细胞胞质内CD68 呈强阳性;d:就诊时皮损;e:组织病理,真皮网状层密集的炎性浸润,主要为组织细胞;f:在严格厌氧条件下从皮损中分离出的分枝状细菌(略)
Fig1 a:There were plaques on the forehead,temple and behind the left ear.b:Histopathology shows intensive diffused infil-tration of histocytes in the dermis;there were many multinuclear giant cells among infiltration.c:Most infiltrated cells and all of the multinuclear giant cells were strong positive for CD68 .d:There were plaques in the face while patient visited our;e:Histopathology shows intensive diffused infiltration of histocytes in the dermis;f:Ramose bacteria was identified with strict anaerobic culture
1.2 电镜标本制作及观察
两例均先后4次在无菌条件下手术切取组织,第一次切取的组织仅做组织病理,其后每次分为5块分别作组织病理、真菌培养、需氧细菌培养、厌氧细菌培养及电镜.依据每次组织病理所见类同,两例最终制作电镜标本的组织均为第二次手术切取的皮损.分别切取表皮及真皮上部、真皮中部、真皮下部,切成约1mm×1mm×2mm大小,以30mL?L-1 戌二醛缓冲液固定,1mL?L-1 锇酸后固定,环氧树脂包埋,制成半薄切片进行定位,然后制成超薄切片,醋酸铀及枸橼酸铅染色,以JEM-2000EX电镜观察.两例均先后2次选不同的包埋块制作超薄切片进行观察,共观察包埋块6个医.学全.在.线www.lindalemus.com.
2 结果
先后观察的6个包埋块所见基本相同.
2.1 细胞成分