1.2 实验动物 取12周龄的雌性wistar大鼠50只,体重约200g左右(由浙江中医药大学实验动物中心提供),饲养室保持良好通风,室温控制在(21±1)℃,湿度63%,噪音<55分贝,自由摄食、饮水,光照与黑暗时间为每12h交替。
1.3 造模方法 腹腔注射氯氨酮(5μg/100g)麻醉条件下,打开B、C、D、E组大鼠腹腔去除双侧卵巢,逐层缝合;A组大鼠仅予以单纯剖腹后立即关闭。造模期间的首3天,肌注青霉素4万u/只,预防感染。
1.4 饲养与给药 造模后大鼠分笼予以常规饲料喂养,第4天起开始给药。正常对照组、模型组每天以蒸馏水 10ml/kg灌胃;阳性对照组每天用浓度为9.4ug/ml的倍美力水溶液以10ml/kg灌胃;高浓度组、低浓度组每天分别用1.5g/ml、0.5g/ml 的益骨口服液以10ml/kg灌胃。整个灌胃过程持续12周。
1.5 观察指标 采用美国 LUNAR公司DPXL型双能X线骨密度仪测定大鼠脊柱与左股骨上干骺端骨密度以万能电子材料试验机作整骨三点弯曲试验。最大载荷20kg,两端跨距20mm,加载速度5mm/min,检测过程由计算机自动描记股骨的载荷——变形曲线。
1.6 数据处理 采用SPSS12.0统计软件包进行统计。各组数据采用x±s表示,各组数据间比较用t检验,计数资料采用x2检验。以P<0.05为显著性差异,P<0.01为非常显著性差异。
2 结果
阳性对照组、正常对照组的骨密度均明显高于模型组,有非常显著性差异(P<0.01)。高浓度组、低浓度组的骨密度亦均明显高于模型组,有非常显著性差异(P<0.05)。高浓度组、低浓度组与阳性对照组、正常对照组之间差异有统计学意义(P< 0.05)。高浓度组与低浓度组之间亦有明显差异(P< 0.05)。如表1所示。表 1 益骨口服液对去势大鼠脊柱与股骨上端骨密度变化的影响与模型组比较,^P<0.05,^^P<0.01;与高低浓度(益骨口服液)组比较,△P<0.05
正常对照组、高浓度组、低浓度组、阳性对照组弹性载荷、最大载荷均明显高于模型组,有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。高浓度组、低浓度组、阳性对照组弹性载荷、最大载荷、低于正常对照组,但明显高于模型组。(P<0.05)高浓度组与低浓度组二者之间亦有明显差异(P< 0.05)。如表2。表 2 益骨口服液对去势大鼠左股骨生物力学变化的影响
3 讨论
就骨质疏松的诊断而言,骨密度测量是目前最有帮助的放射学检查方法[3]。模型组脊柱BMD 和股骨BMD 较正常对照组明显下降,差异均有统计学意义,BMD 降低是骨质疏松时骨变化的重要特征,国内外学者一致认为双能X线骨密度仪是测量大鼠BMD 的精确、有效方法,本实验采用双能X 线密度仪对大鼠脊柱和股骨进行了检测,结果其他各组明显高于模型组。