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我们在前期试验中将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接，构建重组质粒pcDNA3.1(+)–EGFP，鞘内直接注射将重组质粒注入大鼠的蛛网膜下腔，绿色荧光显示新构建的质粒虽未整合入神经元细胞，但被蛛网膜下腔上皮细胞摄取并表达。随后又将前脑啡肽原(PENK)基因与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接，鞘内直接注射将重组质粒注入坐骨神经慢性压迫模型大鼠的蛛网膜下腔，产生较好和较长时间的镇痛效果。为了进一步研究前脑啡肽基因在体内被体细胞摄取表达的部位。
本实验将人前脑啡肽基因(PENK)连接到绿色荧光载体(pEGFPC3)上，构建pEGFPC3PENK载体，为后续疼痛基因治疗的体内外实验奠定了分子生物学基础。
【参考文献】
[1] Gerra G,Maremmani I,Capovani B,et al.Longacting opioidagonists in the treatment of heroin addiction: why should we call them“substitution”[J].Subst Use Misuse,2009, 44(5) :663-671.
[2] Glorioso JC,Fink DJ.Gene therapy for pain:introduction to the special issue[J].Gene Ther, 2009, 16(4):453-454.
[3] Federici T,Boulis N.Gene therapy for peripheral nervous system diseases[J].Curr Gene Ther, 2007, 7(4):239-248.
[4] Pinto M,Castro AR,Tshudy F,et al.Opioids modulate pain facilitation from the dorsal reticular nucleus[J]. Mol Cell Neurosci, 2008,39(4):50医.学全.在.线网站www.lindalemus.com.
[5] Xu W,Sanz A,Pardo L,et al.Activation of the mu opioid receptor involves conformational rearrangements of multiple transmembrane domains[J].Biochemistry, 2008, 47(40): 10576-10586.
[6] 杨茂元,毕好生,郑从义,等.蛛网膜下腔移植转脑啡肤基因细胞用于治疗神经性 疼痛[J].中华麻醉学杂志, 1999, 19(12):722-724.
[7] 臧卫东. APA微囊化转前脑啡肽原基因细胞移植镇痛的实验研究[D].郑州大学，2006：97-99.
[8] 徐颖, 田玉科, 田学愎, 等. 可诱导表达脑啡肽的大鼠星形胶质细胞株的构建[J].第四军医大学学报, 2006, 27(5):400-403
