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天麻素的纯化技术
近年来有学者采用了大孔树脂吸附法-醇沉纯化天麻素，选择非极性至极性共计6种不同极性的树脂:HPD-400，HPD-500，HPD-600，AB-8，D101，DM130。采用静态吸附法以天麻素的比吸附量和解吸附率为指标，优选出AB-8吸附树脂，上柱药液生药浓度为1mL含0．5g生药，上样量为2g/g(干树脂:药材)，以1～2BV/h的流速上柱循环吸附1h，径高比1∶7，分别用2BV蒸馏水，6BV的5%乙醇以3～4BV/h的流速洗脱，弃去水洗液，收集5%乙醇洗脱液，按照此工艺天麻提取物经大孔吸附树脂纯化后，出膏率亦从20．72%降低至5．87%。经过测定天麻素的含量发现单独使用大孔树脂的天麻的含量为11．21%。经3批验证，此工艺可以稳定地将提取物中天麻素含量纯化到11．00%以上，纯度不高。然后结合醇溶液调pH沉淀法对天麻大孔树脂纯化物进一步去杂质，加95%乙醇至醇体积分数80%，静置24h，滤过，用40%的NaOH溶液调至pH8．0，静置24h，滤过，收集滤液，减压浓缩，天麻提取物的出膏率为2．33%，其中天麻素的含量为23．50%，天麻总苷含量为33．52%，该工艺较传统醇沉工艺大大提高提取物天麻素的含量，且工艺稳定、可靠［23］。刘东锋等［24］发明了一种采用ODS反相硅胶法精制天麻素的方法，具体的方法是采用体积分数70%的乙醇水溶液回流提取4次，每次提取3h，提取液回收溶剂至无醇味，过聚酰胺树脂纯化，分别用体积分数20%、40%、60%的乙醇水溶液梯度洗脱，收集40%和60%洗脱液合并、浓缩。ODS硅胶装柱，另取ODS硅胶与浓缩液拌样，挥干溶剂，上柱，用体积分数55%的乙腈水溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥即得产品，从1kg天麻粉中得到纯品10．1g，纯度为99．3%医.学全.在.线网站www.lindalemus.com。
天麻素的检测技术
天麻素的检测技术有高效液相色谱法、分光光度法、高效毛细管电泳、薄层色谱法和化学法，高效液相色谱法为《中国药典》规定方法，在天麻素检测中应用最为广泛。高效液相色谱法2010年版《中国药典》规定天麻素的检测方法是高效液相色谱法(HighPerformanceLiquidChroma-tography，HPLC)。天麻素提取的工艺参数:稀乙醇为溶剂，料液比1∶25，热回流提取3h，放冷，称重补足重量。色谱条件:色谱柱InertsilODS-3C18柱(5μm，150mm×4．6mm)。流动相:乙腈0．05%磷酸(3∶97)，流速1mL/min，检测波长220nm。流动相系统除药典收载的以外，还有许多类似的检测方法及系统，主要有甲醇-磷酸盐溶液-水、乙腈-水-磷酸、甲醇-水-三乙胺、甲醇-水-冰醋酸系统等，检测波长多为270nm、22lnm、220nm等。也有研究报道建立了液质技术测定天麻中天麻素含量［25］。紫外分光光度法保玉心等［26］采用紫外分光光度法(UV)在220nm波长下进行天麻素的紫外检测，张芙蓉等［27］在223nm波长下进行天麻素的紫外检测，该方法快速、简便，UV法经HPLC验证，结果表明UV法和HPLC两种方法测定结果之间并无显著性差异。近红外光谱法近红外光谱法(Near-infraredspectroscopy，NIS)是用可见光和红外光之间波长范围的光谱进行分析的方法。杜伟锋等［28］采用近红外光谱法对不同产地的天麻中天麻素含量进行快速测定，以HPLC分析值作为参照，采用傅里叶变换近红外漫反射光谱技术采集天麻的近红外光谱，结合偏最小二乘法(PLS)建立天麻素含量的快速测定方法，该方法准确、快速、简便，可实现大批量样品的快速分析。蒙杰丹等［29］也采用近红外光谱结合偏最小二乘法建立了同时测定通天口服液中天麻素与芍药苷含量的方法。高效毛细管电泳法高效毛细管电泳(High-PerformaceCapillaryElectrophoresis，HPCE)是荷电粒子或离子以电场为驱动力，薄层色谱法熊慧林等［31］利用薄层色谱法(Thinlayerchromatography，TCL)鉴别天麻素，薄层板为硅胶G薄层板，展开剂为醋酸乙酯-甲醇-水(9∶1∶0．2)，显色剂是质量分数5%的磷钼酸乙醇溶液，波长600nm，单波长线性扫描。王孟等［32］也采用相同的展开剂，显色剂是质量分数10%的磷钼酸溶液，105℃加热使斑点清晰，在与天麻、天麻素对照液色谱相应的位置上显相同颜色的斑点，分离清晰，阴性对照无干扰。化学测定法化学定性［33］是利用天麻乙醇提取液与硝酸盐作用，加热，溶液呈玫瑰红，并发生黄色沉淀。也有报道使用鲁米诺-过氧化氢-高锰酸钾发光体系，对天麻素进行了定量分析［34］。
展望
天麻素有镇静、催眠、镇痛、增强免疫力等作用，在治疗心脑血管病、微循环系统疾病，头痛眩晕等方面疗效显著。我国老龄化社会日渐形成，高血压、高血脂群体不断增大，为具有降压、降脂疗效的天麻素提供了巨大的市场空间。除了以上这些在天麻提取中已经成熟应用的技术外，随着科学技术的高速发展，越来越多的提取新技术、新方法，如超临界流体萃取、双水相萃取、分子蒸馏技术、膜分离技术等以后可能将会运用到天麻素提取分离研究上，将会在提高天麻制剂质量、减少服用剂量、提高生产效率、降低环境污染等方面起到积极的推动作用，必将极大地推动天麻产业的发展。
作者：陈琛 李新生 周建军 杨培君 徐顶巧 冯振斌 田惠玲 赵斌 单位：陕西理工学院 陕西省天麻山茱萸技术研究工程中心 陕西汉王药业有限公司
