刘忠华,等.不同中药复方对禽流感病毒感染模型小鼠的影响第3期17动物分组将110只BALB/c小鼠分为6组:藿香正气散组(简称藿香组,剂量为264 g·kg-1·d-1),桂枝汤组(剂量为156 g·kg-1·d-1),桑菊饮组(剂量为344 g·kg-1·d-1),病毒唑组(阳性药物对照,剂量为70 mg·kg-1·d-1),模型对照组(简称模型组),尿囊液对照组(简称尿囊液组)。接毒前2 d,各组小鼠每天分别灌胃给药,接毒当天上午给药,下午将100 μL H5N1禽流感病毒〔小鼠半数致死剂量(MLD50)为100625/mL〕用移液枪滴入各组小鼠鼻腔,尿囊液组小鼠滴入100 μL正常尿囊液。接毒后正常饲养,供给饲料量为标准日粮,高压灭菌水足量供给,雌雄分笼饲养。
18观察指标
181临床症状观察各组呼吸、精神状况、毛色、双耳、四肢和尾巴色泽、行为活动、粪便、饮食、体质量等变化。
182体温变化采用电子体温计测量肛温,接毒前5 d每天1次,接毒后12 h测1次,以后每天1次,连续9 d。
183死亡情况记录接毒后各组小鼠出现死亡的时间,计算死亡率及死亡保护率:p死亡=N死亡/N总数×100%,p死亡保护=(N总数-N死亡)/N总数×100%。
184肺指数实验结束后,称量各组小鼠肺质量和体质量,计算肺指数和肺指数抑制率:I肺=m肺/m体,p肺指数抑制=(I肺,模型组-I肺,给药组)/I肺,模型组×100%。
19统计学方法实验数据采用SPSS 130统计软件进行处理,采用单变量方差分析,方差不齐采用秩和检验;计数资料采用χ2检验,检验水平α=005。
2结果
21临床症状小鼠在接毒后第2天出现精神不振,反应迟钝,皱毛,弓背,食欲下降及呼吸急促,爱扎堆,蜷缩,竖毛,颤抖;第3~7天出现死亡,部分小鼠出现腹泻,尿囊液组小鼠未出现临床症状。藿香组、桂枝汤组、桑菊饮组、病毒唑组小鼠于接种后的第4~5天出现明显临床症状,模型组于接种后第3天出现明显临床症状,第6天模型组小鼠全部死亡。
22各组体温变化表1结果显示:接毒后第1天至第9天,各组小鼠体温均显著下降,与尿囊液组比较差异均有显著性意义(P<005)。第5天3组中药复方小鼠体温均较模型组显著升高(P<005),作用强弱依次为藿香正气散>桂枝汤>桑菊饮,其中藿香组作用更佳,第5~7天体温与病毒唑组比较差异均有显著性意义(P<005)医.学全.在.线www.lindalemus.com。
23各组体质量变化表2结果显示:接毒后第2天开始,各组小鼠体质量均显著减轻,与尿囊液组比较差异有显著性意义(P<005),作用强弱依次为桑菊饮>桂枝汤>藿香正气散。第4~5天,藿香组、桂枝汤组、桑菊饮组与模型组比较,差异均有显著性意义(P<005),表明中药干预能减缓禽流感小鼠体质量降低。
24各组小鼠的死亡保护率表3结果显示:接毒后第4~5天,藿香组、桂枝汤组、桑菊饮组、病毒唑组小鼠死亡保护率高于模型组(P<005)。第6~8天藿香组、桂枝汤组、桑菊饮组,第9天藿香组、桂枝汤组小鼠死亡保护率高于病毒唑组(均P<005),作用强弱依次为桑菊饮>桂枝汤>藿香正气散。
表4结果显示:藿香组、桂枝汤组死亡保护率升高,与病毒唑组比较差异均有显著性意义(P<005)。
25各组小鼠肺指数表5结果显示:模型组肺指数显著升高(P<005),藿香组、桂枝汤组、桑菊饮组肺指数显著降低,与模型组比较差异均有显著性意义(P<005),且3组肺指数抑制率均高于病毒唑组。表1各组小鼠体温变化比较(x±s)表2各组小鼠体质量变化表3各组小鼠每天死亡保护率表4各组小鼠死亡保护率比较表5各组小鼠肺指数比较