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1.1 实验动物与分组 健康成年雄性SD大鼠，清洁级，体重220～250 g，由南通大学实验动物中心提供。大鼠随机分为：(1) 正常组;(2) 模型组：将10 μl 0.1 mol/L的FeCl3溶液注射于大鼠左侧额叶皮质感觉运动区域;(3) 假手术组：将等量生理盐水注射于大鼠左侧额叶皮质感觉运动区域;(4) 甘珀酸干预组：造模前 30 min予甘珀酸20 mg/kg腹腔注射，此后每日腹腔注射一次甘珀酸，剂量仍为20 mg/kg，每组8只。
1.2 主要试剂及仪器 甘珀酸(美国Sigma公司);FeCl3(上海市金山化工厂);自凝造牙粉和自凝牙托水(上海医疗器械股份有限公司齿科材料厂);502瞬间强力胶(浙江金鹏化工股份有限公司);立体定向器(江湾Ⅰ型C，上海川沙花木农机厂);多道生理记录仪(RM-6240，成都仪器厂);微量进样器(10 μl，上海安亭微量进样器厂)。
1.3 模型制备 铁离子注射建立PTE大鼠模型，参照 Willmore 提出的方法[2]，并稍作改良。大鼠以10%水合氯醛溶液(350 mg/kg)腹腔麻醉后，固定于立体定向器上，常规消毒皮肤后，沿头顶正中线切开头皮，切口长约 3.0 cm。根据大鼠脑立体定位图谱[3]，在左侧颅骨冠状缝后 2.0 mm、矢状缝旁 2.0 mm处钻一个直径 2.0 mm的孔，微量进样器缓慢进针至靶点，进针深度为 2.5 mm，缓慢注射0.1 mol/L的FeCl3溶液，速率l μl/min，注射剂量为10 μl，注射后留针 10 min，以防注射入脑组织内的FeCl3溢出。另外再钻5个安放电极的孔，孔的位置分别为前囟前 2.0 mm、中线左右旁开 3.0 mm，以及前囟后 6.0 mm、中线左右旁开 2.0 mm，参考电极置于额骨正中(图1)。所有电极予自凝牙托水调和牙托粉，并加502胶水固定。最后缝合头顶皮肤，常规消毒后，将大鼠从立体定位仪上取下，观察大鼠的行为学变化，并记录大鼠脑电图。
1.4 痫性发作及脑电图的记录 注射过程中及随后 120 min内观察大鼠行为学表现，此后于每日上午 9点至 11点定时观察，并记录发作等级。根据经典的大鼠癫痫发作 Racine分级[4]判断大鼠是否有癫痫发作行为。评分标准：0级：无任何癫痫发作行为;1级：面部阵挛，咀嚼，哈欠;2级：1级加点头，面部抽搐，颈部肌肉抽动;3级：2级加前肢或后肢抽搐;4级：3级加后肢站立，身体突然立起;5级：4级加四肢节律性抽动，下肢强直伴全身背曲或抽动，跌倒。大鼠于制模前 30 min至造模后 120 min内分别记录大鼠的脑电变化。在制模后 24 h、 7 d及 14 d接受处理前各描记EEG 1h。当出现尖波、棘波、尖(棘)慢综合波、多棘慢综合波时判定为癫痫样脑电活动。
1.5 统计学方法 所有数据用x±s表示，利用Stata 10.0统计软件处理数据。两组间比较采用 t 检验，多组比较采用单因素方差分析，两两比较采用 q 检验，以 P<0.05 表示差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 大鼠癫痫发作的形式 大鼠注射FeCl3成功致痫后主要表现为：大鼠出现凝视、不动，呈阵发性，此后开始出现下颌快速咬动，伴有面部肌肉抽动，面肌抽搐时可见大鼠的胡须有节律地抖动，双眼眼裂变大，眼球向外凸出，整个过程持续时间约1～2 min，如此反复发作，为轻度惊厥的表现，继之出现一侧前肢震颤，或表现为“湿狗样”抖动动作，持续时间约5～10 s;继而站立、双前肢震颤及持续性点头;直至双前肢震颤加重，失去平衡跌倒而出现全身性强直-阵挛性发作;严重发作时大鼠可突然出现整个身体向后翻转360°后跳起，离地高度约10～20 cm，连续数次后摔倒在地，出现四肢剧烈抽搐，抽搐时间约0.5～1 min，之后瘫软在地，静止不动约5～10 min后恢复正常活动。致痫后大鼠可见明显的躁动不安，表现为不停地奔跑，持续时间约5～10 min。
2.2 大鼠癫痫发作的频率 正常组大鼠无癫痫发作行为学表现。假手术组大鼠亦未观察到任何抽搐发作表现。模型组大鼠在麻醉期间偶有身体轻微的颤抖，基本上没有自主活动，有时可见间歇性对侧头部阵挛及咀嚼;模型建立后3～8 h，大鼠开始出现癫痫发作，主要表现为咀嚼、头部阵挛、面部抽动、点头及前肢阵挛的发作，多为Racine 分级1～3级，约每4～6 h发作1次，此后逐渐增多，且发作级别呈逐天增高;5～7 d时，开始出现身体站立、双前肢震颤及跌倒发作，多为4～5级;7 d时，80%大鼠反复出现自发性的4～5级发作，但发作频率逐渐下降，平均每天发作约2～3次。同时可见，应用甘珀酸干预后，大鼠行为学发作频率明显减少，程度减轻。
2.3 大鼠癫痫发作的评分 图2所示为正常组、模型组、假手术组以及甘珀酸干预组大鼠每日最高发作等级评分的比较。由图可见，与模型组相比，应用甘珀酸干预后，大鼠每日最高发作程度明显减轻(P<0.05，P<0.01)。
2.4 脑电图变化 正常大鼠的EEG均为以低幅β、α为主要节律的基础波，散在θ波，波幅<100 μV(图3)。假手术组未见典型的癫痫样放电。模型组大鼠注射FeCl3后 60 min内，注射侧出现偶发的单个中幅尖波;此后注射侧癫痫样放电增多，EEG上出现多种形式的癫痫样放电波形(图4、5)，主要表现为波幅明显高出背景波、频率明显高于背景波的高幅棘波、棘慢波综合、尖波及尖慢波等。频率最快可达30 Hz，波幅高达270 μV以上，发作后可出现抑制波。伴随EEG上出现癫痫样放电的同时大鼠行为学上表现为身体背屈强直，四肢剧烈抽搐，双眼眼裂变大，眼球向外凸出。模型建立后 7 d、14 d时，在观察到抽搐发作的同时各导联均记录到阵发的节律性的高幅棘波、棘慢波综合和尖波，大鼠癫痫发作间期EEG上仍可见阵发的节律性的波幅明显高出背景波的高幅尖波和尖慢波。与模型组相比，甘珀酸干预组大鼠行为学、痫样放电潜伏期不同程度延长、频率明显减慢、波幅明显降低(P<0.05)，差别具有统计学意义(见表1)，同样时间痫样放电数也有减少医.学.全.在.线www.lindalemus.com。
3 讨 论
在癫痫的发生机制上，神经元异常同步放电成为大家所公认。GJ是目前发现的细胞间唯一能够直接进行物质信息交换的通道，它可能是神经胶质细胞-神经元信息交流的部位之一。Meister等[5]发现，2个相邻神经节细胞动作电位传递的间隔时间几乎为零，GJ的这种直接传递，被认为是促使神经元活动达到同步化的重要原因。因此，近年来备受关注，认为与癫痫的发生、特殊化异常电位的快速扩布有重要关联。此前许多研究主要是GJ阻断剂抑制或减轻癫痫发作的研究。Bostanci等[6]发现青霉素致痫后 1h给予不同剂量的甘珀酸可以抑制痫样棘波的波幅和频率，减轻行为学发作。Medina-Ceja等[7] 在4-AP致痫的大鼠模型也得到了类似的结果，并且发现在应用甘珀酸(22±4.4)min时完全阻止了痫性发作，且作用持续达 120 min。这些都支持GJ在癫痫特征性的神经元同步化发放的形成和发展过程中发挥了作用。
