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1.2 方法 将固定于70%乙醇中的肿瘤组织标本经0.9氯化钠溶液冲洗后，放在150目的铜网上，下置一平皿，用眼科剪刀将组织剪碎，用眼科镊子轻搓组织，边搓边用0.9氯化钠溶液冲洗，经300目尼龙网滤除细胞团块，收集滤下的细胞悬液。1 000 r/min，离心5 min，弃上清;加入1 ml PBS将细胞悬浮计数并调整细胞浓度为1×107/ml时，此悬浮液为单分散细胞悬液。将单细胞悬液分装3管(阴性、阳性对照组及实验组)，实验组加入雄激素受体抗体100 μl，充分振摇，36℃避光反应30 min;实验组及阳性对照组各加入二抗100 μl，避光反应，然后进行FCM检测。兔抗多克隆雄激素受体抗体购自北京博奥森生物技术有限公司。
1.3 结果判定 AR经流式细胞仪检测后所得结果为具体数值，无需判定。对标本组织同时行免疫组化检测结果判定标准为：ER、PR阳性表达为细胞胞核呈棕黄色颗粒，Her2阳性染色位于胞膜，阳性标准为胞膜染色或胞膜、胞浆同时染色。每张切片中阳性细胞<25%或无阳性细胞为阴性，阳性细胞>25%为阳性。
1.4 统计学分析 应用SPSS 11.5统计软件，计量资料以±s表示多组间比较用方差分析，两组间比较采用t检验，相关分析采用直线相关和等级相关，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 AR在乳腺癌中的表达 AR值最小值为291.79，最大值为512.49，平均为(361±58)。
2.2 乳腺癌组织中的AR表达与临床特点、病理参数的相关性 60例乳腺癌组织中AR的不同表达与肿瘤大小、组织学分级、TNM分期、淋巴结转移情况、月经情况、ER、PR、HER2比较情况见表1。我们得到以下结果：AR的表达与肿瘤大小有关联，肿瘤≤2 cm者，雄激素受体表达较高(427±42)，与2～5 cm肿瘤及﹥5 cm肿瘤(343±32，314±29)相比差别有统计学意义(P=0.000);其表达与组织学分级有关联，组织学分级Ⅰ级者雄激素受体表达值较高(447±50)，与Ⅱ、Ⅲ级者(357±31，322±38)相比差异有统计学意义(P=0.000)。与ER蛋白表达呈正相关(r=0.347，P=0.000)。与TNM分期、绝经与否，PR、Her2及淋巴结转移情况不相关(P>0.05)。表1 AR表达与乳腺癌临床特点、病理指标的关系
3 讨论
AR属于核受体超家族成员，主要存在于靶细胞的核内。人AR基因定位于X染色体长臂(Xq11～12)，含有8个外显子和7个内含子，全长约90 kb，编码918个氨基酸。AR有4个功能结构域，分别是低保守的氨基端结构域、高保守的DNA结合结构域、铰链区与高保守的羧基端配体结合结构域，不同的结构域有不同的功能[7]。AR调节转录活化主要是通过氨基端和羧基端两个结构域来完成的医.学全.在.线网站www.lindalemus.com。
本研究发现，AR表达与肿瘤大小、组织学分级呈负相关。即肿瘤越小、组织学分级越低，AR的表达越高，我们的研究结果与Ogawa等[8，9]的研究一致。Ogawa等[8]应用免疫组化法检测227例原发性乳腺癌中AR的表达，发现越小的肿瘤AR阳性率越高(P=0.045)，Monifar等[9]应用抗AR单克隆抗体对乳腺癌标本进行检测发现AR在Ⅰ级的肿瘤表达为88%，在Ⅱ级和Ⅲ级的肿瘤中分别为71%和47%。表明AR的高表达可能预示肿瘤恶性程度较低。
我们的研究还发现，AR的表达与ER的阳性表达率呈正相关，即ER阳性者AR的表达高，与文献报道相似[8,9]。Ogawa等[8]研究发现AR与ER表达相关(P=0.027)。Monifar等[9]的研究表明：90%分化Ⅰ级的侵袭性癌与55%分化Ⅱ级的侵袭性癌表现为ER+/AR+，而绝大多数分化Ⅲ级的侵袭性癌表现为ER/AR。因为目前一般认为ER的表达是预后良好与否的指标，即ER阳性者预后较好，而AR的表达又与ER呈正相关，所以AR的高表达也可能预示着预后良好。国外文献已有相关报道[4，10] 。Agrawal等[10]研究表明AR阳性者5年内的局部复发率为22.6%(48/212)，阴性者的局部复发率为52.2% (144/276)。在所有局部复发患者中，AR阳性者所占比率为25%，明显低于AR阴性者(占75%)，差异有统计学意义(P=0.023)。Shippinger等[4]的研究也有相似发现，即AR阳性患者复发后的平均生存时间(21.89个月)高于AR阴性患者(11.99月)。我们的研究还需进行长期随访，才能得出预后结论。我们的研究没有发现AR与Her2、PR、TNM分期、淋巴结转移情况和绝经与否有关。
