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1 资料与方法
1.1 一般资料 2007年4月至2008年1月在山东大学齐鲁儿童医院住院的HSP患儿44例，男24例，女20例， 5～13岁，均符合《实用儿科学》第七版HSP的诊断标准。急性期44例均有皮肤紫癜，其中初次发作40例，2次发作4例(初次发病恢复后1个月内复发2例，2个月内复发1例，1年内复发1例);缓解期40例(其余4例拒绝抽血)，为患儿临床症状(皮肤紫癜、腹痛、关节痛)消失2周之后;所有患儿入院前2周内未使用过激素、抗凝剂及止血剂等药物，并排除血液、肝脏及心脏疾病。患儿住院期间每周化验尿常规2次，出院后每周化验1次，随访6个月。按中华医学会儿科学会肾脏病学组小儿肾小球疾病的临床分类、诊断及治疗标准[5]，根据在HSP病程中(均在6个月内)是否出现血尿和/或蛋白尿，将HSP患儿分为肾脏受累组与非肾脏受累组。肾脏受累组：出现血尿和/或蛋白尿，并排除其他原因导致血尿及蛋白尿的肾脏疾病;非肾脏受累组：HSP发病6个月化验尿常规正常。健康对照组18例，为同期在山东大学齐鲁儿童医院查体中心健康查体儿童，男10例，女8例，4～12岁，中位年龄7.86岁，既往无血液、肝脏、肾脏及心脏疾病。
1.2 仪器与试剂 流式细胞仪由德国PAROPARPEC公司生产;酶标仪为澳大利亚anthos2010型; PECD61、FITCCD41a 、FITCCD62P等单克隆抗体均购自美国BD公司;vWF检测试剂盒购自上海太阳生物技术有限公司。
1.3 标本采集 所有受检者晨起抽静脉血，分别置于含有1/10体积0.109?mmol/L枸橼酸钠抗凝液的2个试管中，充分混匀，30?min内送检。其中1管全血用于测定CD41a/CD61及CD62P;另1管用于测定vWF。所有标本以3?000?r/min(离心半径10?cm)离心10?min，取血浆置-40?℃冰箱保存，2周内检测。
1.4 检测方法 将荧光标记单克隆抗体PECD61分别加入3组试管中，各10?μL，第1组试管加入全血5?μL，第2、3组试管先分别加入FITCCD41a、FITCCD62P各10?μL，然后分别加入全血5?μL;振荡器混匀， 在25?℃室温避光孵育20?min后，加预冷的1%多聚甲醛1?mL震荡混匀，置于4?℃冰箱避光孵育20?min，然后利用流式细胞仪进行检测。上机时首先用第1组试管根据前向角和侧向角光散射信号设定血小板门，然后通过CD61标记进一步确认设门内血小板在95%以上。测定方法严格按照操作说明进行。vWF的检测采用酶联免疫吸附双抗体夹心法，检测前标本置37?℃水浴中迅速溶化，然后按试剂盒说明书进行操作。
1.5 统计学处理 统计学分析采用SPSS11.5统计学软件进行，计量资料用±s表示，组间比较采用t检验，以P<0.01为差异有统计学意义医.学全.在.线网站www.lindalemus.com。
2 结 果
2.1 HSP患儿CD41a/CD61、CD62P及vWF的水平 见表1。 HSP患儿急性期CD41a/CD61、 CD62P、 vWF水平均高于健康对照组， 差异有统计学意义(P均<0.01); 治疗后患儿皮疹、 腹痛、 关节痛消失， 进入缓解期时三者水平均下降， 急性期与缓解期比较， 差异有统计学意义(P均<0.01)。患儿缓解期CD41a/CD61、CD62P及vWF水平虽然略高于健康对照组，但差异无统计学意义(P>0.01)。表1 HSP患儿急性期、缓解期及对照组CD41a/CD61、CD62P、vWF水平的比较
