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医学论文范文:蜂胶黄酮对D半乳糖致衰老小鼠脑蛋白质、核酸代谢的影响
【摘要】 目的 探讨蜂胶黄酮对衰老模型小鼠学习记忆行为的影响及其作用机制。方法 采用同位素标记物体内掺入法观察蜂胶黄酮各组小鼠脑蛋白质及核酸代谢的变化。结果 蜂胶黄酮增加小鼠脑组织蛋白质、DNA和RNA含量。结论 蜂胶黄酮能明显增强小鼠学习记忆功能，其作用机制与其促进的蛋白质、核酸等生物大分子形成密切相关。
【关键词】 蜂胶黄酮 学习记忆能力 蛋白质 核酸代谢
近年来研究发现蜂胶具有明显的抗癌、调节血糖、增强机体免疫功能、抗菌、抑制病毒等效应〔1〕，并可提高小鼠肝脏过氧化氢酶与超氧化物歧化酶的活性〔2〕。为进一步探讨蜂胶黄酮抗衰老作用机制,本研究通过同位素标记物掺入法观察蜂胶黄酮对衰老模型小鼠脑蛋白质及核酸代谢的影响，为蜂胶黄酮抗衰老的临床应用提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 药物及试剂
蜂胶黄酮由黑龙江中医药大学生化教研室提纯，并经黑龙江省中药研究所鉴定，稀释成黄酮含量为15 mg/ml使用。D半乳糖购于Sigma公司。3H胸腺嘧啶核苷（3HTdR)、3H尿嘧啶核苷（3HUR)和3H亮氨酸（3HLeu)均购于中国科学院上海原子核研究所。PPO（2、5二苯基恶唑)、POPOP（1，4双〔5苯基恶唑基2〕苯)为上海化学试剂一厂产品，闪烁纯。三氯醋酸、无水乙醇、乙醚、甲酸、二氧六环、萘均为分析纯。
1.2 仪器
液体闪烁计数仪，Beckman公司；D37520型高速冷冻离心机,德国HERAEUS公司；JY98Ⅲ型超声波细胞粉碎机,宁波科生仪器厂；跳台装置为蚌埠医学院无线电二厂医.学全.在.线网站www.lindalemus.com。
1.3 方法
1.3.1 分组
昆明种健康小鼠，体重(25±2) g，雌雄各半，小白鼠常规喂养6 d，随机分为空白对照组、D半乳糖衰老模型和蜂胶黄酮组，每组10只，实验小鼠均由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。除空白对照组外, 衰老模型组和蜂胶黄酮组每天用D半乳糖150 mg/kg颈背部皮下注射连续30 d，空白对照组皮下注射等剂量生理盐水,自由进食进水；造模同时蜂胶黄酮组灌胃蜂胶黄酮300 mg/kg，空白对照组及衰老模型组灌服等量生理盐水，每天1次，连续给药30 d。衰老模型组连续给D半乳糖30 d后,小鼠行动迟缓,毛色灰暗,形体瘦弱,呈明显的衰老体征,证明衰老模型成功建立〔3〕。
1.3.2 蜂胶黄酮对3HLeu掺入小鼠脑组织蛋白质影响〔4〕
按照上述方法连续给药30 d。实验前12 h禁食，各组腹腔注射3HLeu 1.48×105 bq(4 μci)/10 g,4 h后断髓处死小鼠，迅速取出脑组织，用滤纸吸去血液，剪碎，用生理盐水制成50 mg/ml的组织匀浆。取0.5 ml组织匀浆置于10 ml试管中，加入10%三氯醋酸2 ml，沉淀离心，3 500 r/min，10 min，弃去上清液，将沉淀用5%三氯醋酸和1∶1醇醚混合物再各洗1次，弃去上清，向沉淀中加88%甲酸0.5 ml，置于90℃水浴中消化20 min，取0.1 ml消化液加入含4 ml闪烁液（PPO 3.0 g、POPOP 0.5 g、萘60 g，加二氧六环至500 ml，避光保存)的闪烁杯中，次日用液体闪烁计数仪测定样品放射性。
