 |
 |
本研究观察了他汀类药物SIM对心肌肥大的防治作用，同时选用钙通道阻滞剂Ver作为阳性对照药。MVA是胆固醇生物合成中HMG-CoA经还原酶作用的产物,有研究表明MVA可通过甲羟戊酸途径拮抗SIM的作用，因此本研究应用MVA作为SIM的拮抗剂，进一步证实SIM对心肌肥大的防治作用。
本研究结果显示， 10-6～10-5 mol/L终浓度的SIM能有效抑制AngⅡ诱导的心肌细胞蛋白合成增加，但当SIM增加至10-4 mol/L以上浓度时，心肌细胞总蛋白含量反而低于对照组，这可能由于过高浓度的SIM对心肌细胞产生毒性作用所致。实验还发现，10-6 mol/L浓度的SIM能明显抑制AngⅡ诱导的心肌细胞蛋白合成和细胞表面积的增加，其效果与钙通道阻滞剂Ver作用相似。表明SIM对AngⅡ诱导的心肌细胞肥大具有明显有效的防治作用。
本研究发现，AngⅡ诱导心肌细胞肥大后，心肌细胞活力明显下降。应用SIM预处理，可以显著提高心肌细胞活力，该作用与阳性对照药钙通道阻滞剂Ver作用效果相似。而同时应用SIM拮抗剂MVA处理后，心肌细胞活力则不再增加，提示MVA可能抑制了SIM提高心肌细胞活力的作用。
电压依赖性钙通道(voltage dependent calcium channel, VDCC)是位于细胞膜的跨膜异源多聚体蛋白质，其中央形成亲水性孔道，孔道的开放或关闭调节着细胞内钙离子的浓度，继而影响细胞功能。心肌细胞膜上只有两种VDCCs，即L-型和T-型钙通道[3]。L型钙通道α1亚单位有四种亚型，但心肌LVDCC仅高表达Cav1.2(α1C)。T-型钙通道α1亚单位有三种亚型组成，但在心脏中仅高表达Cav3.1(α1G)和Cav3.2(α1H)[4]。L-型钙通道由于在心肌兴奋-收缩耦联中的重要作用而被广泛研究。而T-型钙通道国内外研究相对较少。近年来随着膜片钳技术、分子克隆技术的应用和发展，使T-型钙通道的研究得以进一步深入。本研究观察了AngⅡ诱导培养的心肌细胞肥大中L-型钙通道α1C及T-型钙通道α1G、α1H表达的变化，以及SIM对心肌钙通道α1C、α1G、α1H各亚单位表达的影响。结果发现，各实验组心肌细胞L-型钙通道α1C蛋白表达水平均无显著性差异 (P>0.05)。对照组心肌细胞中可见α1G、α1H蛋白的表达;AngⅡ组α1G、α1H蛋白表达较对照组均显著增加(P<0.01);给予SIM或Ver干预后二者的蛋白表达水平出现不同程度的下降，且二干预组之间比较无明显差异;但同时给予SIM和MVA处理后则未能抑制T-型钙通道α1G、α1H蛋白表达的增加。业已证明，在正常成年大鼠心室肌细胞中仅有L-型钙通道表达,而T-型钙通道存在于胎鼠心肌细胞中，出生后T-型钙通道的密度逐渐下降，发育至正常成年大鼠后，心室肌细胞中则不再有T-型钙通道表达[5]。近年来有研究表明[6-7]，多种原因引起的心肌肥大均发现有T-型钙通道的异常表达和T-型钙电流的出现，这与本实验结果相似，提示T-型钙通道α1G、α1H亚单位蛋白的重新再表达可能是心肌细胞肥大的信号反应，T-型钙通道可能在心肌肥大发生发展过程中起着重要作用。
Ca2+作为细胞内第二信使，在细胞生理和病理过程中起着重要作用。本研究利用钙离子荧光探针从单细胞水平证实，心肌细胞肥大可显著增加细胞内游离钙离子浓度，造成细胞钙超载，本研究结果与其他实验室报道是一致的[8]。细胞内钙超载，一方面启动细胞坏死及凋亡程序，发生不可逆坏死;另一方面诱发后除极，导致恶性心律失常发生，造成心肌细胞的损伤。本研究在培养的心肌细胞实验中观察到，Ver预处理可抑制AngⅡ引起的[Ca2+ ]i内流增加。应用不同浓度的SIM处理后发现，SIM呈浓度依赖性抑制AngⅡ引起的[Ca2+ ]i内流增加。以上实验结果表明SIM与Ver作用效果相似，对心肌细胞肥大引起的细胞内钙超载均具有明显的抑制作用。
综上所述， SIM对心肌细胞肥大具有明显的防治作用，其作用机制可能与SIM通过抑制心肌细胞肥大所致的T-型钙通道亚单位α1G、α1H蛋白重新再表达有关，同时与其抑制细胞内钙超载密切相关。但与L-型钙通道亚单位α1C蛋白表达无关医学 全在.线提供www.lindalemus.com。
【参考文献】
[1] Wu L， Zhao L， Zhen Q，et al. Simvastatin attenuates hypertrophic responses induced by cardiotrophin-1 via JAK-STAT pathway in cultured cardiomyocytes[J].Mol Cell Biochem，2006，284(1-2):65-71.
[2] Liu J，Shen Q，Wu Y Simvatatin prevents cardiac hypertrophy in vitro and in vivo via JAK/STAT pathway[J].Life Sci，2008,82(19-20):991-996.
[3] Ono K, Lijima T. Pathophysiological significance of T-type Ca2+ channels: Properties and functional roles of T-type Ca2+ channels in cardiac pacemaking[J]. J Pharmacol Sci，2005,99(3):197-204.
[4] Roden Dm, Balser JR, George AL Jr,et al. Cardiac ion channels[J].Annu Rev Physiol,2002(64):431-475.
[5] Ferron L, Capuano V,Deroubaix E,et al. Function and molecular characterization of a T-type Ca2+ channel during fetal and postnatal rat heart development[J].J Mol Cell Cardiol，2002,34(5):533-546.
[6] Horiba M, Muto T, Ueda N, et al. T-type Ca2+ channel blockers prevent cardiac cell hypertrophy through an inhibition of calcineurin- NFAT3 activation as well as L-type Ca2+ channel blockers[J]. Life Sci，2008,82(11-12):554-560.
[7] Gaborit N, Steenman M, Lamirault G. Human atrial ion channel and transporter subunit gene-expression remodeling associated with valvular heart disease and atrial fibrillation[J].Circulation，2005,112(4):471-481.
[8] Lu YM, Shioda N, Han F, et al. Imbalance between CaM kinase II and calcineurin activities impairs caffeine-induced calcium release in hypertrophic cardiomyocytes[J].Biochem Pharmacol，2007,74(12):1727-1737.
