三 原始图像的获取
任何修改工作都是在原始图像的基础上进行,如果原始图像质量不佳,那必将事倍功半。下面对有利于原始图像质量的细节略做介绍。因为不同来源的图像,其注意点也不一样,因此分开。
1)来自照相的 获得的数码文件多是在显微镜视野下采集的,因此聚焦和暴光是必须要考虑的。显微镜下景深极浅,意味着聚焦清晰不能依赖于小光圈,而应靠精细调节显微镜。注意应使照相通道和目镜观察通道相一致,即目镜下最清晰时也是拍照最清晰的,以方便拍照。拍照时相机应选择最大光圈,广角端。不要使用望远变焦,它使得视野变小且放大倍数难以计算。聚焦不清的另一主要问题在于相机的抖动。虽然一般相机都固定在显微镜上,但按快门时的手震有时仍不可忽视,这时一个简单的办法是利用相机的自拍功能,按下快门之后经倒数计时后正式拍摄。一般明视野下,利用相机的自动暴光都能达到要求;暗视野下有时需要高达几分钟的暴光时间,这是一般数码相机达不到的,只能通过专业的CCD系统并用软件帮助采集图像。一些软件可以用来修改暴光不足的照片,但暴光过度往往使图像细节丢失。显微镜下拍摄时闪光灯不起作用,将它关闭。通过白平衡,一般不会产生严重的偏色。另外,由于镜头的原因,边角处难免会有失真,因此,请保证目标在视野正中,镜头成像最佳范围内,而无须铺满整个视野,现在的数码相机的像素值已经足够高了。
2)来自采样软件的 采样软件所采得的原始图形一般储存在特定格式的文件中,通过该软件或配套的分析软件打开。有的采样或分析软件可以将图形直接输出到word或Photoshop中,但有的则不能。这时最简单的办法就是通过抓屏或抓图软件来获取。通过采样软件获取的图形输出后仅做些切割、拼合的工作,不应该做更多其它的修改。图形在采样软件中可以通过改变x; y轴的缩放比改变形状,因此一组图片应该选择统一的标准,并且标注x, y标尺。图形的精细程度和采样频率相关,采样频率越高,图片越精细。图片中不必要的颜色信息可以在Photoshop中丢弃,图像/调整/去色医.学.全.在.线www.lindalemus.com。
3)来自统计作图软件的 常用的统计作图软件包括origin、sigmaplot等,功能非常强大,但一般应用excel也可满足。这些软件作的图一般都可直接输出到word及Photoshop中(如excel,选中图片,右键复制,打开Photoshop,新建,自动跳出匹配的画布大小,编辑/粘贴 即可),所以修改图片应多在统计软件中,输出后不宜多做修改。图中尽量不要用颜色或灰度来区别组间,而多利用形状特征。如excel的柱状图,选择 填充/图案,里面有足够多的选择项。各统计作图软件功能强大,超出了本文叙述的范围,就不多说了。