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1.1 材料
1.1.1 实验动物Wistar大鼠20只,清洁级,雄性,体重(150±30)g,由新疆医科大学实验动物中心提供。
1.1.2 主要仪器
RQH350 型人工气候箱(上海精宏实验设备有限公司); JXDT1型小鼠跳台仪;BS110型电子天平(北京赛多科斯天平有限公司)，低温超速离心机(美国Beckman公司产品)。
1.1.3 主要试剂
大鼠血清ACTH、CORT放射免疫试剂盒(北京北方生物技术研究所)，IL1β、IL6、TNFα酶联免疫试剂盒(美国R&D公司)，其他试剂均为国产分析纯试剂。
1.2 方法
1.2.1 动物分组和处理
健康雄性Wistar大鼠共20只,体重(150±30) g,每笼5只, 普通环境，自然光照，自由进食水。实验前对每只动物进行一般状态的观察并记录,舌象每天拍照1 次。稳定饲养3 d后随机分为正常对照组(10只)和模型组(10只),正常对照组正常饲养(每笼普通鼠饲料250 g/d、灭菌食用水500 ml/d,随机饮食水)，未受任何刺激,室温下喂养, 温度(25±3) ℃,相对湿度60%～80%。
1.2.2 异常黑胆质证载体大鼠模型的制作
1.2.2.1 干寒饲养环境
按照文献[34]和维吾尔医学异常体液与环境的关系,将实验动物置于适宜的喂养环境。采用人工气候箱模拟干寒环境,温度(6±1)℃,相对湿度25%～32.8%,每日11∶00 AM～9∶00 PM将模型组动物置于人工气候箱中。正常对照组与模型组均从6∶00 AM～6∶00 PM 提供光线。
1.2.2.2 干寒属性的饲料在普通鼠饲料中按每公斤7∶3的比例加入相等比例的芫荽子和大麦,然后制成颗粒状干饲料,委托新疆维吾尔自治区实验动物中心加工。喂养方法根据文献[5]并适当改进,每笼实验动物提供饲料250 g/d、灭菌食用水500 ml/d。
1.2.2.3 慢性间断足底电刺激按照文献[69]并略加改进,采用间断足底电刺激(第1周每次30 min、电压35 V、1次/d;第2周每次35 min、电压40 V、1次/d;第3周每次45 min、电压45 V、1次/d)，产生慢性应激。
1.2.2.4 制动将大鼠放入大鼠固定器中，水平置于实验台，保证大鼠不受压，以不能回转为度，但其运动受制动。
1.2.2.5 强迫游泳大鼠每日置于水温(25±1)℃的水中强迫游泳5 min, 待毛发变干后放回饲养室医.学.全.在.线www.lindalemus.com。
1.3 观察指标
1.3.1 一般状态建模前后动物的舌苔、体形、皮肤毛发、行为状态、情绪反应、兴奋程度、睡眠状态、体重、饮食量和饮水量的变化。
1.3.2 定量指标(1)体重: 每天施加刺激因素后，正常对照组和模型组禁食4 h，然后称量每只大鼠体重并记录。(2)饮食量:每日2∶00 PM 加饲料250 g,次日10∶00 AM 称饲料余量(总饮食量),根据下述公式计算每100 g体重相对应的饮食量并记录：每100 g体重的饮食量= (100 g×总饮食量)/总体重。(3)饮水量:每日2∶00 PM给水500 ml,次日10∶00 AM称剩余水量(总饮水量),根据下述公式计算每100 g体重相对应的饮水量并记录：每100 g体重的饮水量= (100 g×总饮水量)/总体重。(4)实验结束后，在麻醉状态下取血，颈椎脱臼处死所有动物，4 ℃离心分离血清，分别采用大鼠ACTH、CORT放射免疫试剂盒，IL1β、IL6、 TNFα酶联免疫试剂盒检测各项指标[10-11]。
1.4 统计学处理采用SPSS16.0软件处理, 饮食量、饮水量数据以均数±标准差(±s)表示,采用t检验进行差异分析，体重按重复测量资料的方差分析法进行差异分析,检验水准α = 0.05。
2 结果
2.1 一般状态的变化与正常对照组相比，模型组动物的体形明显偏瘦，毛发手感粗糙，观之无光泽、易掉，性情急躁易激惹，争食争水现象明显，行动较迟缓，易倦怠，睡眠浅且易醒，皮温较低，大便干燥，体重增长速度缓慢,饮食量、饮水量增多,舌暗紫有瘀斑(图1)。
2.2 2组体重的变化造模前，模型组与正常对照组大鼠体重差异无统计学意义(P>0.05)。从造模第11天至第21天，模型组大鼠体重明显低于正常对照组，差异有统计学意义(P<0.01)(表1)。表1造模前和造模期2组体重变化(略)
2.3 2组每100 g体重饮食量变化造模第3天，模型组与正常对照组大鼠饮食量差异无统计学意义(P>0.05);从造模第7天开始，模型组大鼠饮食量比正常对照组大鼠逐渐增多，到造模第21天，模型组大鼠饮食量与正常对照组相比，差异均有统计学意义(P<0.01)(表2)。表2 造模期2组饮食量变化(略)
2.4 2组每100 g体重饮水量变化造模第3天，模型组与正常对照组大鼠饮水量差异无统计学意义(P>0.05);从造模第7天开始到造模第21天，模型组大鼠饮水量与正常对照组相比，差异均有统计学意义(P<0.01)(表3)。表3造模期2组饮水量变化(略)
