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1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 临床资料
连续收集胃镜下活检组织，由有经验的消化科医师在胃镜下取材，同时进行组织学检查，依据组织学检查结果收集浅表性胃炎、萎缩性胃炎和胃溃疡各40例，取健康成年人并经病理检查无炎症活动及Hp感染的正常胃黏膜25例。其中男78例，女62例。年龄19～72岁，平均年龄41岁。所有受试者在检查前2周内未服用过质子泵抑制剂、铋剂及抗生素，无服用其他药物史，肝肾功能均正常。慢性胃炎在炎症明显处和胃窦、胃体各取材1块，胃溃疡在其边缘和胃窦、胃体各取材1块，立即投入40g/L多聚甲醛中固定。
1.1.2 Hp根治治疗
方案为奥美拉唑20mg、阿莫西林1.0g、替硝唑1.0g，均每天2次，疗程7d。停药4周后复查14C呼气试验，阴性者判定为Hp根除，并同时采集胃黏膜组织做MIF检测。
1.1.3 试剂
兔抗人MIF多克隆抗体购自美国Santa Cruze公司，SP9001免疫组织化学染色试剂盒及DAB显色试剂盒购自广州中杉金桥，Warthinstarry银染色试剂为实验室自配。
1.2 方法
1.2.1 免疫组织化学法
PBS代替一抗做阴性对照，已经确诊的肺腺癌做阳性对照，将甲醛固定的组织经过常规脱水、浸蜡、包埋后切片，厚度为4μm，切片经常规脱蜡水化，高压抗原修复，加100mL/L H2O2以灭活内源性过氧化物酶，加封闭用正常山羊血清工作液，加一抗(浓度1∶400)，于4℃冰箱中过夜，加生物素标记山羊抗兔IgG，加辣根酶标记链霉卵白素工作液，DAB显色剂显色，苏木素复染，MIF在细胞浆中表达，阳性呈棕黄色。
1.2.2 结果判断
参照AXIOTIS等[4]标准，由两位病理医生采用盲法(独立检测) 在高倍镜(×400)下读片。每张切片随机观察10个不重复的视野(不足10个视野的，按实际观察到的视野计数)，根据阳性细胞占同类细胞总数的百分率及细胞染色强度综合判定。染色强度评分标准：不着色为0分，浅粉色或黄色为1分，粉色或棕黄色为2分，红色或黄褐色为3分。阳性细胞所占整张片比例评分标准：阳性细胞数<10%为0分，10%～40%为1分，41%～70%为2分，>70%为3分。两种评分相加，0～1分为(-)，2分为弱阳性(+)，3～4分为阳性()，5～6分为强阳性()。≤2分的定为阴性，>2分的定为阳性医.学全.在.线网站www.lindalemus.com。
1.2.3 Warthinstarry银染色法检测Hp
切片经常规脱蜡至水，放入10g/L AgNO3水溶液，60℃避光浸染60min，完成染色后倾去浸银液，用双蒸水涮洗。显影工作液配制后即刻(1min内)倒入装有切片的玻璃皿中，室温下避光染色2～4min，显影至切片组织呈棕褐色，立即弃去显影液，流水冲洗停止显影过程，切片常规脱水至透明，光学树脂封片，Hp在镜下可见在金黄色的组织背景中，呈清晰黑色短棒状或S状。
1.3 统计学处理
实验数据采用SPSS13.0统计软件包进行处理，各组间对照采用四格表资料的Pearson卡方检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
