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1 材料和方法
1.1 动物分组
33只雄性SD大鼠(南京医科大学实验中心提供)，体重200～250 g，随机分为非烫伤正常参照组(正常组)、传统TPN组(传统组)和添加Ala-Gln的TPN组(二肽组)，每组11只。
1.2 中心静脉置管
禁食24 h后，传统组和二肽组大鼠称重，2%氯氨酮(100 mg/kg)腹腔内注射麻醉后，以8%～10%硫化钠水溶液脱去颈部、背部体毛，温水擦净，碘伏消毒皮肤，右颈部作纵形切口，显露右侧颈外静脉，远端结扎，近端插入外径1.2 mm、内径0.6 mm的硅胶管至上腔静脉(插入1.0～2.0 cm)。硅胶管自皮下隧道从背部肩胛间皮下引出后接保护弹簧及自制旋转装置。正常组不置管。
1.3 烫伤模型制作和饲养
根据公式S=0.091×W2/3〔S为体表面积(m2)、W为大鼠体重(kg)〕计算出大鼠体表面积，在大鼠仍处于麻醉状态下，将传统组和二肽组大鼠已行脱毛处理的背部浸入100℃水中12 s，造成30%体表面积的Ⅲ度烫伤。伤后立即按体重腹腔内注射林格液(2.5 ml·100 g-1)，置入代谢笼，自中心静脉置管用微量注射泵持续注林格液(11.25 ml·100 g-1)抗休克治疗。正常组不做烫伤处理，置入笼中自由饮食。饲养室内温度保持在25℃左右，每天保持约12 h光照，紫外线消毒室内空气每天1次，乙醇擦洗代谢笼以保持代谢笼清洁;每天碘伏消毒烫伤创面和手术切口。
1.4 营养支持
传统组和二肽组大鼠接受等热量等氮量TPN：热量780 kJ·kg-1体重，采用葡萄糖和脂肪乳剂(30%英特利匹特，华瑞公司生产)双能源3∶2比例提供。每千克体重氮量1.8 g：传统组氮源由8.5%乐凡命(华瑞公司生产)供给，二肽组氮源由8.5%乐凡命中添加Ala-Gln(费森尤斯公司生产的20%力肽，其中力肽提供的氮量占总氮量的48%)。非蛋白热量：氮量=434 kJ∶1 g。2组TPN液中均加入适量的水溶性、脂溶性维生素、微量元素、电解质以及胰岛素(按每10 g葡萄糖1 U给予)。TPN液配方见表1。自中心静脉插管用微量注射泵均匀持续输注TPN液，烫伤当日每天每100 g体重给予11.25 ml，第2～7天每天每100 g体重给予22.5 ml。表1 传统组和二肽组TPN营养液配方(略)
1.5 标本收集与检测医.学全.在.线网站www.lindalemus.com
第8天晨处死动物，取标本检测各观察指标。
1.5.1 体重变化医.学全.在.线网站www.lindalemus.com
第8天大鼠称重，观察TPN前后的体重变化情况。
1.5.2 血生化检查
腹主动脉穿刺取血，置入干燥管中，血凝后离心20 min (1500 r·min-1)，取上清-20℃冷冻保存，采用全自动生化分析仪检测血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(G)，采用免疫浊度法检测前白蛋白(PAB)、转铁蛋白(TRF)。
1.5.3 肌肉组织中Gln含量的测定
取大腿肌肉一块，立即液氮冷冻，移入-80℃深低温水箱保存，集中用高效液相色谱法测定肌肉中Gln的含量[1]。
1.5.4 氮平衡和累积氮平衡测定
收集大鼠24 h尿液，微量凯氏定氮法检测24 h尿液中氮量。氮平衡(g·kg-1)=〔入氮(g)-出氮(g)〕/体重(kg)。TPN时，入氮即营养液中氨基酸的含氮量，出氮主要为24 h尿液中的氮量。第n天的累积氮平衡=第1～n天的氮平衡的累加。
1.5.5 空肠黏膜形态学观察
距Treitz韧带8 cm处取一段空肠，10%甲醛溶液固定，常规病理切片，于光镜下用多媒体彩色病理图文分析系统测量绒毛高度(VH)、绒毛宽度(VW)、隐窝深度及黏膜厚度，根据公式VSA=л×VW×VH计算出绒毛表面积(VSA)，每张切片随机测量5个绒毛，取平均值。
1.5.6 创面肉芽组织的观察
取背部烫伤皮肤一块，10%甲醛固定，常规石蜡包埋、切片、苏木精-伊红染色、树脂封片，光镜下观察肉芽组织中毛细血管和成纤维细胞的密度，每张切片高倍镜观察至少8个不同的视野，对毛细血管和成纤维细胞进行计数，取平均值。
1.6 统计学处理
全部数据采用±s表示，应用SPSS 10.0软件包进行数据处理，采用t检验进行差异比较。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
