肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素1β(IL-1β)是引起组织细胞损伤的重要细胞因子,两者均参与急性胰腺炎的病理过程。近年来已有关于血必净对血液中细胞因子影响的报道[1-2],但血必净对急性胰腺炎时胰腺组织TNF-α、IL-1β的表达有无影响尚未见报道。本实验旨在通过观察血必净注射液对大鼠胰腺组织TNF-α、IL-1β表达的影响,探讨血必净对大鼠急性胰腺炎的保护作用及可能机制。
1 材料和方法
1.1 动物模型与分组 将SD大鼠48只(体重200~250 g, 由徐州医学院实验动物中心提供)随机分为假手术组、胰腺炎组和治疗组(n=16),假手术组仅行开关腹手术,胰腺炎组经胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠(2 ml/kg,美国Sigma公司)制作胰腺炎模型,治疗组在胰腺炎模型基础上予血必净干预。术前3天,治疗组经尾静脉注射血必净注射液4 ml·kg-1·d-1(天津红日药业股份有限公司生产);假手术组、胰腺炎组同时间点给予等量生理盐水。3组分别于制模术后4h、8 h时点处死大鼠,取胰腺标本进行检验。
1.2 组织病理学检查 切取胰腺标本制成石蜡切片后行苏木精-伊红染色,光镜下观察胰腺组织病理学变化。
1.3 TNF-α、IL-1β表达检测 免疫组化染色法(试剂盒均购自武汉博士德生物工程有限公司)测胰腺组织TNF-α、IL-1β表达,结果应用计算机进行图像灰度分析,以积分光密度值(D)作计量分析,每张片选4个视野。
1.4 统计学处理 使用SPSS 11.0统计软件进行统计,数据以±s表示。计量资料采用t检验,计数资料采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。医.学.全.在.线www.lindalemus.com
2 结 果
2.1 组织病理学结果 假手术组胰腺组织肉眼及镜下结构无明显异常。胰腺炎组肉眼观胰腺明显肿胀,伴有出血坏死;镜下见间质血管扩张、淤血,灶状胰腺腺泡与脂肪坏死,大量炎性细胞浸润,红细胞渗出,胰腺细胞结构消失。治疗组肉眼病变及镜下观察组织结构破坏明显减轻。
2.2 免疫组化测定 治疗组TNF-α、IL-1β含量显著低于胰腺炎组(P<0.01 ),见表1、2。表1 各组TNF-α的D值表2 各组IL-1β的D值(n=8,±s)与假手术组比较: