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[摘要] 目的 探索苦参碱对肝癌HepG2细胞增殖及其细胞自噬的影响，为临床探索有效的肝癌综合治疗方案提供实验依据。 方法 采用MTT法和流式细胞仪检测肝癌HepG2细胞增殖抑制率及其细胞周期的变化；荧光显微镜定性观察肝癌细胞自噬情况。 结果 苦参碱抑制肝癌HepG2细胞的增殖，且随苦参碱浓度的增加和时间的延长，肝癌HepG2细胞的抑制率增加（P < 0.05)。流式细胞仪检测示：苦参碱组细胞周期中G1期细胞增多，S期细胞减少（P < 0.05)。荧光显微镜检测：肝癌HepG2细胞质中有自噬体形成，且随苦参碱浓度的增加，自噬体越来越多。 结论 苦参碱对肝癌HepG2细胞增殖有一定的抑制作用，苦参碱抑制肝癌细胞的同时诱导了自噬的产生。苦参碱诱导肝癌HepG2细胞自噬多发生在细胞周期的G1 期。
[关键词] 苦参碱；肝癌细胞；自噬；细胞周期
[中图分类号] R735.7 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013)03（a)-0011-03
在中国传统医药中，苦参碱是一种从苦参、山豆根中提取的生物碱，其分子式为C15H24N2O。而苦参碱早被广泛用于治疗病毒性肝炎、肝纤维 化、心律失常等疾病[1]。国内外研究表明[2]：无论是在体内还是体外，苦参碱具有较高的抗肿瘤活性。它可以抑制肿瘤增殖、诱导分化、诱导凋亡、抗转移 等作用，同时又具有免疫调节、升高白细胞、缓解癌痛等许多常规化疗药物所不具备的优势。此外，研究发现苦参碱诱导了大鼠C6胶质瘤细胞的自噬[3]。而自 噬与肿瘤关系密切，同样在抑制肿瘤中起着非常重要的作用[4-5]。细胞自噬在辅助化疗药物治疗恶性肿瘤方面起着非常重要的作用。本实验通过研究不同浓度 的苦参碱作用于肝癌HepG2细胞，探讨苦参碱对肝癌HepG2细胞细胞周期以及细胞自噬的影响，为临床化疗药物治疗肝癌提供理论基础。
1 资料与方法
1.1 一般资料
肝癌HepG2细胞由北京协和医学院提供。苦参碱（Matrine，广州白云山明兴制药有限公司)、DMEM 4.5 g/L Glu（Gibco公司)、PBS液、胎牛血清（美国Sigma公司)、单丹磺酞戊二胺（MDC)（美国Sigma公司)、二甲基亚砜（DMSO)、荧光 显微镜（日本OlympuS公司)、CO2培养箱、离心机（北京医用离心机厂)、流式细胞仪（美国BD公司，型号：FACSCalibur)、电热恒温培 养箱（河北省黄石市医疗器件厂)等。医.学全.在.线网站www.lindalemus.com
1.2 方法
1.2.1 细胞培养及处理 将肝癌HepG2细胞培养在含10%胎牛血清的DMEM 培养液的培养瓶中，在37℃、5%CO2、饱和湿度下常规培养。显微镜下观察细胞贴壁达80%时，用胰酶消化处理，取对数期细胞进行实验。
