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特种医学论文:苦参碱对肝癌细胞增殖及其细胞自噬的影响

来源:本站原创 更新:2013-10-24 论文投稿平台

特种医学论文:苦参碱对肝癌细胞增殖及其细胞自噬的影响

[摘要] 目的 探索苦参碱对肝癌HepG2细胞增殖及其细胞自噬的影响,为临床探索有效的肝癌综合治疗方案提供实验依据。 方法 采用MTT法和流式细胞仪检测肝癌HepG2细胞增殖抑制率及其细胞周期的变化;荧光显微镜定性观察肝癌细胞自噬情况。 结果 苦参碱抑制肝癌HepG2细胞的增殖,且随苦参碱浓度的增加和时间的延长,肝癌HepG2细胞的抑制率增加(P < 0.05)。流式细胞仪检测示:苦参碱组细胞周期中G1期细胞增多,S期细胞减少(P < 0.05)。荧光显微镜检测:肝癌HepG2细胞质中有自噬体形成,且随苦参碱浓度的增加,自噬体越来越多。 结论 苦参碱对肝癌HepG2细胞增殖有一定的抑制作用,苦参碱抑制肝癌细胞的同时诱导了自噬的产生。苦参碱诱导肝癌HepG2细胞自噬多发生在细胞周期的G1 期。

[关键词] 苦参碱;肝癌细胞;自噬;细胞周期

[中图分类号] R735.7 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2013)03(a)-0011-03

在中国传统医药中,苦参碱是一种从苦参、山豆根中提取的生物碱,其分子式为C15H24N2O。而苦参碱早被广泛用于治疗病毒性肝炎、肝纤维 化、心律失常等疾病[1]。国内外研究表明[2]:无论是在体内还是体外,苦参碱具有较高的抗肿瘤活性。它可以抑制肿瘤增殖、诱导分化、诱导凋亡、抗转移 等作用,同时又具有免疫调节、升高白细胞、缓解癌痛等许多常规化疗药物所不具备的优势。此外,研究发现苦参碱诱导了大鼠C6胶质瘤细胞的自噬[3]。而自 噬与肿瘤关系密切,同样在抑制肿瘤中起着非常重要的作用[4-5]。细胞自噬在辅助化疗药物治疗恶性肿瘤方面起着非常重要的作用。本实验通过研究不同浓度 的苦参碱作用于肝癌HepG2细胞,探讨苦参碱对肝癌HepG2细胞细胞周期以及细胞自噬的影响,为临床化疗药物治疗肝癌提供理论基础。

1 资料与方法

1.1 一般资料

肝癌HepG2细胞由北京协和医学院提供。苦参碱(Matrine,广州白云山明兴制药有限公司)、DMEM 4.5 g/L Glu(Gibco公司)、PBS液、胎牛血清(美国Sigma公司)、单丹磺酞戊二胺(MDC)(美国Sigma公司)、二甲基亚砜(DMSO)、荧光 显微镜(日本OlympuS公司)、CO2培养箱、离心机(北京医用离心机厂)、流式细胞仪(美国BD公司,型号:FACSCalibur)、电热恒温培 养箱(河北省黄石市医疗器件厂)等。医.学全.在.线网站www.lindalemus.com

1.2 方法

1.2.1 细胞培养及处理 将肝癌HepG2细胞培养在含10%胎牛血清的DMEM 培养液的培养瓶中,在37℃、5%CO2、饱和湿度下常规培养。显微镜下观察细胞贴壁达80%时,用胰酶消化处理,取对数期细胞进行实验。


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