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病毒感染的实验室检查诊断
来源:医学全在线 更新:2007/12/2 字体:

  病毒感染的实验室检查包括病毒分离与鉴定、病毒核酸与抗原的直接检出以及特异性抗体的检测。临床医师根据流行病学资料,疾病的症状与体征综合判断可能为何种病毒感染,留取适宜的标本送检。

  一、检材的采集与送检

  病毒性疾病通常采集血液、鼻咽分泌液、咯痰、粪便、脑脊液、疱疹内容物、活检组织或尸检组织等。

  供分离病毒、检出核酸及抗原的标本的,要求:

  (一)尽早采取在发病初期(急性期)采取,较易检出病毒,越迟阳性率越低。

  (二)部位适宜由感染部位采取,如呼吸道感染采取鼻咽洗漱液或咯痰;肠道感染采取粪便;脑内感染采取脑脊液;皮肤感染采取病灶组织;有病毒血症时采取血液。

  (三)冷藏速送病毒离活体后在室温下很易死亡,故采得检材应尽快送检。若距离实验室较远,应将检材放入装有冰块或干冰的空器内送检。病变组织则应保存于50%的甘油缓冲盐水中。污染检材,如鼻咽分泌液、粪便等应加入青霉素链霉素或庆大毒素等,以免杂菌污染细胞或鸡胚,而影响病毒分离。

  检测特异性抗体需要采取急性期与恢复期双份血清,第一份尽可能在发病后立即采取,第二份在发病后2~3周采取。血清标本放4℃-20℃保存,试验前血清标本以56℃30分钟处理去除非特异性物质及补体。无菌性脑炎患者也可取脑脊液检测特异性lgM。

表23-1 病毒检材采集与检验结果的关系

采取标本的时期

检查病毒及其成分

测定抗体

潜伏期及前驱期

刚发病或急性期

恢复期及康复期

较难查见

最多查见

很难查见

未增多

未增多或增多不明显

明显增多(常超过4倍)

表23-2 供病毒分离的检材

临床表现

常见病毒 帮助诊断有用的检材

呼吸道感染

腺病毒

巨细胞病毒

流感病毒

副流感病毒

呼肠孤病毒

合胞病毒

咽试、肛拭

咽试或含漱液、尿液

咽拭或含漱液

咽拭含漱液

咽拭、粪便或肛拭

咽拭或含漱液、鼻咽洗液

出疹疾病 柯萨奇病毒

巨细胞病毒

埃可病毒

EB病毒

单纯疱疹病毒

麻疹病毒

风疹病毒

水痘带状疱疹病毒

粪便或肛拭、咽拭

咽拭或含漱液、尿液

粪便或肛拭、咽拭

咽拭或含漱液

病灶棉拭或吸取液、咽拭

咽拭或含漱液、尿液

咽洗液、鼻咽拭

病灶棉拭或吸取液、咽拭

脑炎 虫媒病毒

单纯疱疹病毒

麻疹病毒

脊髓灰质炎病毒

血液、脑脊液

脑活检、脑脊液、疱疹棉拭或吸取液

脑脊液、咽拭或含漱液、尿液

粪便或肛拭、咽拭、脑脊液

无菌性脑膜炎 柯萨奇病毒

埃可病毒

腮腺炎病毒

脑脊髓液、粪便或肛拭、咽拭

脑脊液、粪便或肛拭、咽拭

脑脊髓液、口颊粘膜棉拭

失天或新生儿感染 巨细胞病毒

风疹病毒

单纯疱疹病毒

尿液、咽拭或含漱液

咽拭或含漱液、尿液

病灶棉拭或吸取液、回拭

眼部感染 腺病毒

单纯疱疹病毒

结膜棉拭、咽拭、肛拭

结膜棉拭、病灶棉拭或吸取液、咽拭

其它感染

巨细胞包涵体疾病

单核细胞增多综合征

心包炎、心肌炎

巨细胞病毒

巨细胞病毒

EB病毒

柯萨奇B病毒

埃可病毒

尿液、咽拭

尿液、咽拭

咽拭或洗液

心包液、粪便、咽拭

心包液、粪便、咽拭

  二、病毒的分离与鉴定

  (一)病毒的分离

  病毒分离的一般程序是:

检验标本→杀灭杂菌(青、链霉素)→接种 易感的动物→出现病状

鸡胚→病变或死亡

细胞培养→细胞病变

→鉴定病毒种型(血清学方法)

  无菌标本(脑脊液、血液、血浆、血清)可直接接种细胞、动物、鸡胚;无菌组织块经培养液洗液洗涤后制成10~20%悬液离心后,取上清接种;咽洗液、粪便、尿、感染组织或昆虫等污染标本在接种前先用抗生素处理,杀死杂菌。

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