幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)可致胃炎、胃或十二指肠溃疡等消化系统疾病,已为不少国内外专家定论。但一般需作胃镜取胃粘膜组织检测。鉴于儿童器闹燥动配合不好,取材不易成功,我院于1993—03~1995—03应用血清学方法测定儿童血清标本1069份,现将调查结果报道如下。
1 对象和方法
1.1 对象
收集本院门诊、消化专科、病区选送的血清标本1031份,男564份,女467份,男女之比为1.21:1;年龄6月龄~14岁,平均6.28岁;病程最短1个月,最长10余年,平均病程1.05年;临床症状以胃痛(或腹痛)为主诉,大部分伴有消化系统症状,如食欲不振、消化不良、恶心呕吐、慢性腹泻及腹胀等。健康对照组28例,男23例,女15例,主要为学龄前儿童,平均年龄5.8岁,近期无消化道疾患。
1.2 方 法
应用间接酶联免疫吸附(ELISA)法测定,由美国Bio—Rod公司提供的试剂盒(批号为93—7,94—2,95—1),应用免疫印迹法提取的特异性抗原包被板,待测病人血清(或浓度标准、质控血清)作为一抗,酶标羊状人I gG(或IgM、IgA)作二抗,TMB作底物霓虹灯色,硫酸终止反应,在490nm处读取OD值及Hp浓度结果。在原操作基础上作了一些修改。抽取儿童静脉血0.5ml~1ml,立即分离血清置于-20℃低温冰箱保存待测。测定当日,将病人血清作1:200稀释,每批标本均设立五个Hp浓度标准(Ou/ML,12.5U/ml,25U/ml,50U/ml,100U/ml)以及两个质控血清(阴性及阳性),并有一空白对照。所有试管容量器皿均经严格消毒,试剂均于检测当日用亚沸蒸馏水新鲜配制。依据Hp浓度标准判断,如果<12.5U/ml为阴性;12.5~20U/ml为可疑阳性,可疑阳性必须在2周后进行复查;>20U/ml为阳性;>40U/ml为强阳性;并参考阳性和阴性质控血清的P/N浓度比值必须为≥2.1。
将1069份血清标本分为4个组。胃肠疾患组340例,经临床体检、上消化道钡餐检查、B超和部分分胃电等检查,证实有胃炎者307例,胃或十二指肠溃疡25例,胃粘膜脱垂8例;腹痛待查组496例,患儿以上腹部或脐周痛为主诉,伴或不伴有消化系统症状,并排除了外科疾患;非消化道疾患组195例,包括肾炎、肺炎、低血钾、过敏性紫癜以及发热待查等等;健康儿童对照组38例,其中30例为市级幼儿园各大、中、小班小孩,8例为6岁~10岁的学龄期儿童。
2 结果
表1 各组儿童血清Hp检测结果
组 别 |
n |
++ |
+ |
± |
- |
阳检率(%) |
胃肠疾患组 |
340 |
134 |
128 |
28 |
50 |
77.0 |
腹痛待查组 |
496 |
88 |
192 |
38 |
178 |
56.0 |
非消化道疾患 |
195 |
|
30 |
39 |
156 |
15.0 |
健康儿童组 |
38 |
|
2 |
2 |
36 |
5.0 |
合 计 |
1069 |
222 |
352 |
107 |
420 |
54.0 |
胃肠疾患组Hp阳检率最高,占262/340(0.77),强阳性检出率也是最强高,阳性占阳性的134/262(0.51);腹痛待查组阳检率占280/496(0.56),强阳性占阳性的88/280(0.31),仅次于胃肠疾患组;非消化道疾患组Hp阳检率占有30/195(0.15);健康儿童对照组Hp阳检率占2/38(0.05)。后两组没有检出强阳生(表1)。
3 讨论
①1069例儿童血清标本检测结果表明:儿童Hp总阳检率还是很高的,占574/1069(0.54)。并且,Hp高浓度(强阳性)含量的检出与胃炎、胃或十二指肠溃疡等胃肠道疾患的发病密切相关。本实验结果提示了当前必须要重视儿童胃肠疾患的筛查工作,早期诊断就能及时治疗,使儿童能迅速恢复健康。②腹痛是儿童常见的症状,我们对腹痛待查患儿496例作了血清学检测,Hp检出率为280/496(0.56),后经进一步检查确诊为胃炎或消化道溃疡218例中,有159例Hp阳性(159/218,占0.73)。故对腹痛患儿也应重视作Hp的筛查工作。③Hp强阳性患儿与年龄以及病程有一定的关系,经222例Hp强阳性患儿统计提示:年龄<6岁且病程在半年内的发病率较低,一般在0.81~0.88;男性发病率略多于女性(1.13:1)。我们的研究也证实了Sullivan等报道:Hp感染的儿童有随年龄增长而增加的现象;以及Loffeld报道经病理组织学检查,对病程偏长的慢性胃炎Hp阳检率在0.9以上的结果相同。④Hp家庭感染率的调查现有资料说明,Hp可以通过人与人或人与动物间的粪与口或口与口间的传播,也有通过唾液或飞沫传播的。我们调查了30例Hp阳性儿童的直系亲属32人,阳检率为32/32(094)。因此,儿童感染与家庭的密切接触传播有关,应提倡家庭中餐具消毒或餐具分用的做法,并可联想在餐馆中餐具消毒和食品卫生的重要性。⑤Hp血清学诊断方法简单、快速、无创伤并易被病人接受,在体检及流行病学调查中,公认为是初筛的好方法,对临床诊断、动态观察、治疗效果和随访工作中,也是很重要的检测手段,迈出其适应于小儿或老人。
郑金娟 张广毓 陈正兰
江苏省南京市儿童医院中心实验室(210008)